产地 | 武汉 |
品牌 | Chemstan |
货号 | CSE00014 |
用途范围 | 科研 |
纯度 | % |
是否进口 | 否 |
概述(Summary)icon
储存条件(Storage)
储存于 -20°C,保质期12个月。
状态(Form)
Liquid
储存溶液(Buffer)
PBS pH7.5,50% glycerol
表达宿主(Host)
大肠杆菌
酶切位点
能识别IgG,在抗体下铰链区的特定位点进行酶切,使IgG水解为完整的F(ab’)2片段和Fc片段.
分子量
38 kDa
纯度
>95% as determined by SDS-PAGE quantitative densitometry by Coomassie Blue Staining.
酶活
50U/μl
比活性
不同批次IdeZ蛋白酶的单位酶活可通过SDS-PAGE分析切割重组IgG的情况而确定.
酶活单位定义
在37℃条件下,反应30min,剪切>95%的1μg重组单克隆IgG所需要的酶量定义为一个活性单位。
酶切反应条件
37℃酶切30min
标签
N-terminal His Tag
使用方法(Standard Operating Procedure)icon
抗体片段化使用建议:
1. 在消化缓冲液或其他适合的缓冲液中加入适量IgG(*量5mg);
2. 在IgG样本中加入IdeZ蛋白酶:每1μg IgG加入1个单位的IdeZ;
3. 将样品置于37℃孵育30-60min。IdeZ蛋白酶在中性pH或接近中性pH的缓冲中活性*。推荐反应缓冲是50mM磷酸钠,150mM NaCl(pH6.6),也可以使用许多常见的生物缓冲液,比如Tris或PBS。在使用此pH范围以外的缓冲液(例如醋酸盐缓冲液)时,孵育时间或酶量需要根据实际情况进行优化。
注意事项:
1.IgG的理想浓度应在1-20mg / ml的范围内;
2.IdeZ蛋白酶有效切割人,人源化,嵌合,绵羊,兔和猴子的IgG以及小鼠IgG2a和IgG3。 IdeZ蛋白酶还将裂解许多Fc融合蛋白以及抗体-药物偶联物(ADC);
3.IdeZ蛋白酶不切割小鼠IgG1 / IgG2b,大鼠,猪,牛或山羊IgG。IdeZ蛋白酶也不会裂解非IgG同种型,包括IgA,IgM,IgD和IgE;
4.IdeZ蛋白酶具有组氨酸标签,易于去除;
5. IdeZ蛋白酶可与PNGase F(Catalogue No. ATE00005)一起用于同一反应中,使用推荐的消化缓冲液一步一步完成Fc聚糖的片段化和去除。
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