15926423062
|
|
| 产地 | 中国 |
| 品牌 | Chemstan |
| 货号 | CS-101859 |
| 用途范围 | 分析检测 |
| 纯度 | 99%% |
| CAS编号 | 1404091-23-1 |
| 规格 | 1mg |
| 是否进口 | 否 |
| 描述 | NucPE1 (Nuclear Peroxy Emerald 1) 是核定位荧光过氧化氢探针, 其特异性定位于细胞核，没有附加的靶向部分。 |
|---|---|
| 相关类别 | 信号通路 >> 其他 >> 其他 研究领域 >> 其他 染料试剂 |
| 体外研究 | NucPE1具有两个主要的可见区域吸收（λabs= 468nm，ε= 27,300M-1cm-1;λabs= 490nm，ε= 26,000M-1cm-1）和弱发射（λem= 530nm，Φ= 0.117） 。 NucPE1与H2O2的反应在其转化为荧光团NucPE1时触发荧光增加，荧光团NucPE1在505nm处具有一个主要吸收带（ε= 19,100M-1cm-1），具有增强的发射（λem= 530nm，Φ= 0.626）。 NucPE1选择性地积聚在多种哺乳动物细胞系的细胞核以及整个模型生物体如C. clegans中，在那里它可以响应H2O2通量的亚细胞变化[1]。 |
| 体内研究 | NucPE1保持在体内选择性靶向细胞核的能力。与野生型同源物相比，NucPE1成像显示过量表达sir-2.1的蠕虫中核H2O2水平降低，支持这种促进寿命的sirtuin蛋白与增强的核ROS池调节之间的联系[1]。 |
| 细胞实验 | 用Ar激光器在514nm激发负载NucPE1的细胞，并使用META检测器在522-554nm之间收集发射。 Hoechst 33342的激发使用MaiTai双光子激光器以780nm脉冲进行，并且在436-501nm之间收集发射。使用相同的显微镜设置同时收集实验中的所有图像。在图像J中进行图像分析。通过选择细胞外的ROI在数据集中测量背景荧光。然后使用该背景数来设置图像的阈值，从而选择NucPE1信号。然后测量该信号的平均荧光强度并将其用作该特定图像的荧光信号。在实验中对所有图像使用相同的阈值设置[1]。使用NucPE1实现核H2O2的测量。将细胞在黑暗中在10μMNucPE1下孵育45分钟。孵育之后进行灰化并通过流式细胞术分析，如上所述。使用MitoSOX探针测量线粒体ROS。将细胞与5μMMitoSOX在黑暗中孵育15分钟。孵育后进行灰化和流式细胞术分析[2]。使用氩激光在488nm激发进行NucPE1探针的实时成像，并使用META检测器在约520nm收集发射。 Hoechst染料与NucPE1一起孵育。当进行NucPE1和PO1的多次染色时，应用多轨扫描模式来获取图像[2]。 |
| 参考文献 | [1]. Stanicka J, et al. NADPH oxidase-generated hydrogen peroxide induces DNA damage in mutant FLT3-expressing leukemia cells. J Biol Chem. 2015 Apr 10;290(15):9348-61. [2]. Dickinson BC, et al. A nuclear-localized fluorescent hydrogen peroxide probe for monitoring sirtuin-mediated oxidative stress responses in vivo. Chem Biol. 2011 Aug 26;18(8):943-8. |
15926423062
武汉科斯坦生物科技有限公司 版权所有(C)2024 XML 技术支持： 盖德化工网 食品商务网
武汉科斯坦生物科技有限公司
