本试剂盒利用竞争酶联免疫分析方法来测定细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP的水平。包被羊抗鼠多克隆抗体在酶标板上，细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP与固定数量的标记辣根过氧化物酶的cAMP竞争性的结合抗cAMP单克隆抗体，采用已知浓度的cAMP标准品来做标准曲线。检测450nm波长下的OD值，吸光度OD值与样品中cAMP的浓度呈反比关系。

基于cAMP标准品所得曲线，通过测得的OD值可以计算出样品中cAMP的浓度，本试剂盒IC50（50% B/B0）约12pmol/mL，检测限约0.15 pmol/mL。