产品名称：RatioWorks PH165, AM pH荧光探针

规格：10x50 ug

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

产品物理化学光谱特性

分子量：612.56

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：463

发射波长(nm)：641

产品介绍

RatioWorks PH165 AM是一种新型荧光探针，可用于测量活细胞中的细胞内pH。 它的双重激发和双重发射使其成为用于分析活细胞的独特比例式pH探针。 在低pH值下，RatioWorks PH165在远红光谱区域的荧光很弱，而在红光谱区域的荧光很强。 随着pH的增加，它在远红光谱中显示出较高的荧光，而在红光谱中显示出较低的荧光。该探针可分别在497/594 nm和578/654 nm双重激发/发射下定量测定4至9范围内的胞质pH。 PH165的pKa为?7.1。 RatioWorks PH165的红色荧光光谱使其适用于绿色荧光团（例如GFP）的多重检测。 RatioWorks PH165 AM具有细胞渗透性，并与各种平台兼容，例如荧光显微镜和酶标仪。

图示

图1.使用RatioWorks PH165，AM和荧光显微镜对HeLa细胞进行比例分析。 将HeLa细胞在37°C下用RatioWorks PH165，AM染色90分钟，然后转移到不同pH的溶液中。 使用Cy3 / TRITC和Cy5滤波器组（红色）获取图像。

图2.使用RatioWorks PH165，AM和酶标仪对HeLa细胞进行比例分析。 将HeLa细胞在37°C下用RatioWorks PH165，AM染色30分钟，然后转移到不同pH的溶液中。 使用Ex / Em = 497/594 nm和578/654 nm使用荧光酶标仪测量RFU，计算并绘制594/654 nm的比值。

参考文献

Intracellular pH Measurements in Glioblastoma Cells Using the pH-Sensitive Dye BCECF
Authors: Galifianakis, N. V., Placantonakis, D. G., Chesler, M.
Journal: Methods Mol Biol (2018): 103-109

Evaluation of BCECF fluorescence ratio imaging to properly measure gastric intramucosal pH variations in vivo
Authors: Rochon, P., Jourdain, M., Mangalaboyi, J., Fourrier, F., Soulie-Begu, S., Buys, B., Dehlin, G., Lesage, J. C., Chambrin, M. C., Mordon, S.
Journal: J Biomed Opt (2007): 064014

Calibration methods and avoidance of errors in measurement of intracellular pH (pHcyt) using the indicator bis(carboxyethyl)-5(6)-carboxyfluorescein (BCECF) in human platelets
Authors: Valant, P. A., Haynes, D. H.
Journal: J Fluoresc (1992): 191-206

Estimation of intramitochondrial pca and ph by fura-2 and 2,7 biscarboxyethyl-5(6)-carboxyfluorescein (bcecf) fluorescence
Authors: Davis MH, Altschuld RA, Jung DW, Brierley GP.
Journal: Biochem Biophys Res Commun (1987): 40