ReadiLink iFluor 555 缺口平移 dsDNA 标记试剂盒-武汉科斯坦生物科技有限公司

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ReadiLink iFluor 555 缺口平移 dsDNA 标记试剂盒

品牌：AAT Bioquest

产地：American

型号：10 Reactions

货号：CS17402

价格： ￥2388/支
发布日期： 2022-03-01
更新日期： 2025-09-19

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产品详请

产地	American
品牌	AAT Bioquest
货号	CS17402
用途	Research Grade
包装规格	10 Reactions
纯度	98%%
CAS编号
是否进口	是

简要概述

ReadiLink iFluor 555 缺口平移 dsDNA 标记试剂盒提供了一种简单有效的方法，可以使用明亮且光稳定的 iFluor 555 染料标记双链 DNA 样本。标记试剂盒为 DNA 标记所需的完整工作流程提供了所有必要的试剂。该方法使用 DNAse 和 DNA 聚合酶的组合来切割 DNA 螺旋的一条链，iFluor 555 染料与之结合。此外，该试剂盒允许用户通过调整 iFluor 555-dUTP 偶联物与 dTTP 的比例来优化掺入和产品大小。它与多种样品材料兼容，包括细菌人工染色体 (BAC) DNA、人类基因组 DNA、纯化的 PCR 产物、超螺旋和线性化质粒 DNA。得到的 iFluor 555 标记 DNA 可用于多种分子生物学技术，例如荧光原位杂交 (FISH)。

适用仪器

热循环仪
仪器规格：	N/A

产品说明书

样品实验方案

简要概述

准备 DNA 样本
向试管中加入试剂
短暂混合并离心
在 15°C 下孵育 60 分钟
将反应置于冰上，然后加入停止溶液并在 65°C 下加热
使用前在冰上放置 5 分钟或在 4°C 下储存
纯化标记的 DNA

注：在开始实验之前，解冻所有成分。在开始标记过程之前，将所有试剂短暂涡旋至底部。

实验步骤

表 1. 各反应每管试剂组成

成分	规格
DNA样本	1 μg DNA 在无核酸酶水中稀释至终体积 34 μL
Nick Translation 缓冲液	5 μL
dNTP 混合物	5 μL
dTTP	2 μL
iFluor 555-dUTP 工作溶液	2 μL
DNA聚合酶I	1 μL
DNA酶I	1 μL
总容积	50 μL

可以优化 iFluor 555-dUTP（组分 A）：dTTP（组分 E）的比例以获得最佳标记条件。
可以优化孵育时间以获得更好的标记。更长的孵育时间将有助于更多的标记，但可能会缩短最终产品的尺寸。
1.向干净的（无核酸酶）0.5 mL 微型离心管或 0.2 mL PCR 管中，按表 1 中所示的顺序添加试剂。
2.通过短暂的涡旋和短暂的离心小心混合试剂。
3.将反应在 15°C 下孵育 60 分钟。
4.孵育后，将反应置于冰上。
5.要终止反应，请添加 5 μL 停止溶液并将样品加热至 65 °C。
6.使用前在冰上放置 5 分钟或在 4°C 下储存。
7.纯化标记的 DNA。

参考文献

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Authors: Gutjahr, Alice and Xu, Shuang-yong
Journal: Nucleic acids research (2014): e77

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Journal: Journal of cellular biochemistry (2012): 1955-65

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Authors: Lanoil, B D and Giovannoni, S J
Journal: Applied and environmental microbiology (1997): 1118-23

An evaluation of a new series of fluorescent dUTPs for fluorescence in situ hybridization.
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Authors: Zhu, Z and Chao, J and Yu, H and Waggoner, A S
Journal: Nucleic acids research (1994): 3418-22