一氧化氮NO荧光探针 DAX-J2 比率 580/460是美国AAT Bioquest生产的检测一氧化氮 的试剂，DAX -J2 红是AAT Bioquest通过一氧化氮（NO ）新开发的一种传感器。它是一种非荧光细胞渗透性试剂，可测量活细胞在生理条件下不含NO和一氧化氮合酶（ NOS）的活性。产生高荧光产物。可以使用滤波器组的Cy3 ®和TRITC检测配备了流式细胞仪和荧光显微镜DAX -J2荧光产物。DAX -J2橙具有明显的优势 1 ）它不需要对NO检测酯的酶活性。 DAF - 2需要细胞内酯酶裂解及其醋酸酯组用于检测NO的活性。因为esterse活动受到细胞健康等诸多因素。 2）DAX -J2产品取决于荧光PH，而DAF - 2有其荧光高度受pH的影响。 3）DAX -J2荧光产物比DAF - 2产品更耐光。 4） 它用于检测NO比DAF- 2更为敏感。 5）它可用于用GFP细胞系或与使用FITC-标记的抗体的多色细胞分析的应用程序。

样品操作及实验分析

1）在DMSO中准备5至10 mM DAX-J2 储备溶液。 通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）将DMSO储备溶液稀释到Hanks溶液中，制成1至10 μM的工作溶液。

2）根据需要处理细胞。

3）在37℃下，将细胞与1-10 μM（来自步骤1），DAX-J2 橙色（目录号16300），红色（目录号16301）或比率580/460（目录号16310）孵育20 -60分钟。

4）用HHBS缓冲液代替染料加载溶液。

5）使用底部读取模式的适当荧光仪器分析细胞。

参考文献

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