15926423062  

产品展厅

iFluor 450 酪胺 * Opal 480 的替代品*
物品单位 价格 品牌
3612 AAT Bioquest
  • 产地:American
  • 型号:200 Slides
  • 货号:CS45097
  • 发布日期: 2022-03-01
  • 更新日期: 2022-03-24
产品详细说明
产地 American
品牌 AAT Bioquest
货号 CS45097
用途范围 Research Grade
纯度 98%%
CAS编号
规格 200 Slides
是否进口
简要概述

iFluor 450 酪酰胺经过优化,可替代 Opal 480 或其他光谱相似的荧光酪酰胺偶联物或 TSA 试剂。 Tyramide 试剂可用于检测细胞和组织中极低丰度的靶标,其荧光信号比直接荧光标记试剂显着改善。结合我们具有更高荧光强度、增强光稳定性和增强水溶性的卓越 iFluor 染料,iFluor 染料标记的酪胺偶联物能够以更高的精度和灵敏度产生荧光信号。


适用仪器


荧光显微镜
激发: 绿色滤波片组
发射: 绿色滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板


产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/渗透/阻断细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中加入一抗
  3. 添加 HRP 标记的二抗
  4. 制备酪胺工作溶液并在室温下涂抹于细胞或组织中 5-10 分钟


溶液配制

储备溶液配制

iFluor 450 酪胺储备液 (200X)
向小瓶中加入 100 μL DMSO 并充分混合。
注意:未使用的酪胺原液可以储存在 2-8 °C。


工作溶液配制

iFluor 450 酪胺工作溶液 (1X)
将 100 μL 的 Tyramide 储备溶液添加到 20 mL 您选择的含有 0.003% H2O2 的缓冲液中。
注意 Tris 缓冲液,pH=7.4 可用于获得最佳性能。
注意 酪胺工作溶液应立即使用,并在使用当天全新配制。
注意 20 mL 溶液可用于 200 次检测。

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案 使用特定溶液进行抗原修复。)


过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 μL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。


酪胺标记

1.向每个样品中添加100 μL 酪胺工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短酪胺的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的最佳孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的酪胺。

2.用PBS冲洗3次。


复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。我们提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波片观察酪胺的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
CS17548 核蓝 DCS1 350/461
CS17550 核绿 DCS1 503/526
CS17551 核橙 DCS1 528/576
CS17552 核红 DCS1 642/660


参考文献

Accessibility-dependent topology studies of membrane proteins using a SpyTag/SpyCatcher protein-ligation system.
Authors: Bae, Yoonji and Lee, Sang Kwon and Chae, Young Chan and Park, Chan Young and Kang, Sebyung
Journal: International journal of biological macromolecules (2021): 171-178

Highly Sensitive and Multiplexed In Situ RNA Profiling with Cleavable Fluorescent Tyramide.
Authors: Xiao, Lu and Labaer, Joshua and Guo, Jia
Journal: Cells (2021)

Immunohistochemical Detection of 5-Hydroxymethylcytosine and 5-Carboxylcytosine in Sections of Zebrafish Embryos.
Authors: Jessop, Peter and Gering, Martin
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2021): 193-208

Multiplexed In Situ Protein Profiling with High-Performance Cleavable Fluorescent Tyramide.
Authors: Pham, Thai and Liao, Renjie and Labaer, Joshua and Guo, Jia
Journal: Molecules (Basel, Switzerland) (2021)

Phenoxy Radical Reactivity of Nucleic Acids: Practical Implications for Biotinylation.
Authors: Wilbanks, Brandon and Garcia, Brian and Byrne, Shane and Dedon, Peter and Maher, L James
Journal: Chembiochem : a European journal of chemical biology (2021): 1400-1404

Single-cell RNA sequencing of human liver reveals hepatic stellate cell heterogeneity.
Authors: Payen, Valéry L and Lavergne, Arnaud and Alevra Sarika, Niki and Colonval, Megan and Karim, Latifa and Deckers, Manon and Najimi, Mustapha and Coppieters, Wouter and Charloteaux, Beno?t and Sokal, Etienne M and El Taghdouini, Adil
Journal: JHEP reports : innovation in hepatology (2021): 100278

Adoptive cell therapy of triple negative breast cancer with redirected cytokine-induced killer cells.
Authors: Sommaggio, Roberta and Cappuzzello, Elisa and Dalla Pietà, Anna and Tosi, Anna and Palmerini, Pierangela and Carpanese, Debora and Nicolè, Lorenzo and Rosato, Antonio
Journal: Oncoimmunology (2020): 1777046

A amperometric immunosensor for sensitive detection of circulating tumor cells using a tyramide signal amplification-based signal enhancement system.
Authors: Zhou, Xiaoyan and Li, Yujian and Wu, Haiping and Huang, Wei and Ju, Huangxian and Ding, Shijia
Journal: Biosensors & bioelectronics (2019): 88-94

A simple, real-time assay of horseradish peroxidase using biolayer interferometry.
Authors: Kojima, Takaaki and Nakane, Ayako and Zhu, Bo and Alfi, Almasul and Nakano, Hideo
Journal: Bioscience, biotechnology, and biochemistry (2019): 1822-1828


< 返回前一个页面 >





联系方式
手机:15926423062
电话:15926423062
手机访问官网

15926423062

武汉科斯坦生物科技有限公司 版权所有(C)2022  XML 技术支持: 食品商务网   盖德化工网  

武汉科斯坦生物科技有限公司