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磷酸基团近红外荧光染料 SunRed
物品单位 价格 品牌
2604 AAT Bioquest
  • 产地:American
  • 型号:5 mg
  • 货号:CS11629
  • 发布日期: 2022-03-01
  • 更新日期: 2022-03-24
产品详细说明
产地 American
品牌 AAT Bioquest
货号 CS11629
用途范围 Research Grade
纯度 98%%
CAS编号
规格 5 mg
是否进口
简要概述

磷酸基团近红外荧光染料 SunRed是美国AAT Bioquest生产的用于磷酸 的试剂盒,磷酸酶催化的太阳红磷酸盐(SRP)的水解产生可以用633nm激光激发并且发射~660nm的太阳红荧光团。虽然Sun Red很容易在633 nm处激发,红色发射约为660 nm,但SRP在633 nm处的吸收非常小,没有红色发射,使SRP成为最敏感的NIR磷酸酶传感器之一。请不要使用DMSO制备储备溶液,因为它会显着增加分析背景。

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 620nm
发射: 660nm
cutoff: 640nm
通道: 黑色孔板


产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在Tris缓冲液(50μL)中制备并添加10 - 50μMSunRed 磷酸盐
2.添加碱性磷酸酶标准品和/或测试样品(50μL)
3.在室温或37°C孵育30至120分钟
4.监测Ex / Em = 620/660 nm处的荧光强度(截止640 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 SunRed 磷酸盐原液:
在无菌水中制备2至10 mM的SunRed 磷酸盐储备液。 注意:应立即使用原液。 注意:不要使用DMSO,ETOH或METH制备储备溶液,因为它会显着增加分析背景。 注意:避光。

 

2.工作溶液

SunRed 磷酸盐工作溶液(2X):
在实验当天,将SunRed 磷酸盐固体溶解在无菌H2O中,或在室温下解冻等份的SunRed 磷酸盐储备溶液。 在100 mM Tris缓冲液或pH 8至9的缓冲液中制备10至50μM的2X工作溶液。建议使用SunRed 磷酸盐终浓度5至25μM测定溶液中的碱性磷酸酶活性。

 

样品分析

1.在碱性磷酸酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL2XSunRed™磷酸盐工作溶液,使总碱性磷酸酶测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μL样品和25μL2XSunRed™磷酸盐工作溶液。

2.在所需温度下孵育反应30至120分钟,避光。

3.用荧光板读数器监测Ex / Em = 620 / 630nm处的荧光增加(在640nm处截止)。

 

参考文献

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Authors: Marchetti S, Onori G, Cametti C.
Journal: J Phys Chem B (2005): 3676

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Green/red dual fluorescence detection of total protein and alkaline phosphate-conjugated probes on blotting membranes
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Journal: Electrophoresis (2001): 896

Characterization of 9H-(1,3-dichlor-9, 9-dimethylacridin-2-ona-7-yl)-phosphate (DDAO) as substrate of PP-2A in a fluorimetric microplate assay for diarrhetic shellfish toxins (DSP)
Authors: Leira F, Vieites JM, Vieytes MR, Botana LM.
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A column centrifugation method for the reconstitution in liposomes of the mitochondrial F0F1 ATP synthase/ATPase
Authors: Vazquez-Contreras E, de Gomez-Puyou MT, Dreyfus G.
Journal: Protein Expr Purif (1996): 55

The electrochemical-proton-gradient-activated states of F0F1 ATPase in plant mitochondria as revealed by detergents
Authors: Valerio M, Diolez P, Haraux F.
Journal: Eur J Biochem (1993): 565


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