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Amplite 比色法酪胺酸检测试剂盒
物品单位 价格 品牌
5244 AAT Bioquest
  • 产地:American
  • 型号:100 Tests
  • 货号:CS11311
  • 发布日期: 2022-03-01
  • 更新日期: 2022-03-24
产品详细说明
产地 American
品牌 AAT Bioquest
货号 CS11311
用途范围 Research Grade
纯度 98%%
CAS编号
规格 100 Tests
是否进口
简要概述

酪氨酸酶是在药物发现的,广泛用于生命科学研究、食品工业和化妆品工业等行业中,因为它在黑色素的生物合成途径中起着重要的作用。酪氨酸酶抑制剂的开发和筛选一直是黑色素瘤相关疾病研究的热点。酪氨酸酶水平和活性在黑色素瘤中高度上调,被认为是监测黑色素瘤相关疾病的可靠测试。AAT Bioquest开发了Amplite 比色酪氨酸酶测定试剂盒。它拥有一步法,操作简单可靠,可以以非常高的灵敏度监测酪氨酸酶的活性。该测定使用专有的底物无色溶液,与酪氨酸酶反应后可明显增加其在510 nm处的吸收。510 nm处吸收的增加与酪氨酸酶活性密切相关。

 

适用仪器


荧光酶标仪  
吸收: 510nm
推荐孔板: 白色透明


产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备和添加标准品和样品(50μL)
2.准备并添加酪氨酸酶蓝工作溶液到标准品和样品孔(50μL)
3.将板在室温下孵育60至120分钟
4.检测510nm处的吸光度

 

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1酪氨酸酶原液(2000 U / mL):
将120μL测定缓冲液(组分B)加入酪氨酸酶标准品(组分A)中并充分混合。 注意:将未使用的酪氨酸酶原液储存在-20°C,一次性使用等分试样。

1.2酪氨酸酶蓝原液(100X):
将50μLDMSO(组分D)加入酪氨酸酶蓝(组分C)中并充分混合。 注意:将未使用的酪氨酸酶蓝原液在-20°C下以一次性等分试样储存。

 

2.标准溶液

酪氨酸酶标准
使用酪氨酸酶原液(2000 U / mL)和测定缓冲液产生400 U / mL终浓度的酪氨酸酶标准溶液(T1)。 然后进行1:2连续稀释以获得剩余的连续稀释的酪氨酸酶标准品(T2-T7)。 注意:井中标准品的最终浓度为2X。 注意:使用提供的标准,如果使用建议的浓度,可以重复生成2条标准曲线。

 

3.工作溶液

酪氨酸酶蓝工作溶液:
通过将5μL酪氨酸酶蓝原液(100X)加入1mL测定缓冲液(组分B)中进行1:100稀释并充分混合。

 

样品分析

T1 T1 TS TS
T2 T2    
T3 T3    
T4 T4    
T5 T5    
T6 T6    
T7 T7    
T8 T8    

表1.白色透明底96孔微孔板中酪氨酸酶标准品和测试样品的布局。 酪氨酸酶标准品(TS1-TS8 = 200至0U / mL),TS =测试样品

1.以下协议可用作指南,应根据需要进行优化。

2.根据测定缓冲液中的建议制备标准品和测试样品,分别加入50ul到微孔板中。

3.将50μL酪氨酸酶蓝工作溶液加入标准品和样品的孔中。

4.将反应在37℃孵育60至120分钟。 注意:反应可保持长达6小时。

5.用光吸收酶标仪在510 nm处检测吸光度。

 

参考文献

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An updated review of tyrosinase inhibitors
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Clinical significance of sequential tyrosinase expression in the peripheral blood of disease-free melanoma patients: a review of literature data
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Tyrosinase: a comprehensive review of its mechanism
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