15926423062  

产品展厅

Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒 红色荧光
物品单位 价格 品牌
2604 AAT Bioquest
  • 产地:American
  • 型号:1 kit
  • 货号:CS11302
  • 发布日期: 2022-03-01
  • 更新日期: 2022-03-24
产品详细说明
产地 American
品牌 AAT Bioquest
货号 CS11302
用途范围 Research Grade
纯度 98%%
CAS编号
规格 1 kit
是否进口
简要概述

Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的谷氨酸检测 的试剂盒,谷氨酸氧化酶属于氧化还原酶的一类,特别能对带有CH-NH2基团供氧受体起反应。它是一种能特异催化水中或者氧气中的L-谷氨酸的酶,可以通过氧化脱氨形成酮戊二酸,氨和过氧化氢。Amplite谷氨酸氧化酶荧光检测试剂盒提供了一种快速超敏感的方法,来检测溶解状态下或者细胞裂解液中的谷氨酸氧化酶。在分析中,L-谷氨酸可以通过谷氨酸氧化酶被氧化成酮戊二酸、氨或者过氧化氢。L-丙氨酸和L-谷氨酸-丙酮酸也参与了这个转氨酶反应,导致多次循环反应,因此显著的增加双氧水的产出。该试剂盒使用我们的Amplite Red底物使其成为双记录模式。红色的荧光信号很容易的通过荧光酶标仪(540/590nm)检测,或者使用酶标仪(576nm)检测。Amplite荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒在100 ul检测体积中能检测到40U/ml的谷氨酸氧化酶。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析,并且无需任何分步骤,就可以轻易地实现自动化。

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色底板


产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.谷氨酸氧化酶标准品或测试样品(50μL)
2.添加谷氨酸氧化酶工作液(50μL)
3.在室温下孵育30-60分钟
4.在Ex / Em = 540 / 590nm处读取荧光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液(250X):
将40μLDMSO(组分F)加入到Amplite Red(组分A)的小瓶中。应立即使用原液。注意:在硫醇如二硫苏糖醇(DTT)和2-巯基乙醇存在下,Amplite Red不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red在高pH(> 8.5)下也不稳定。因此,反应应在pH7-8下进行。推荐使用所提供的测定缓冲液,pH7.4。

1.2 HRP库存解决方案(400X):
将200μL测定缓冲液(组分B)加入到辣根过氧化物酶(组分C)的小瓶中。

1.3 谷氨酸储备溶液(400X):
将1.0mL ddH 2 O加入到谷氨酸小瓶(组分D)中以制备400X谷氨酸储备溶液。

1.4 谷氨酸氧化酶(GO)标准溶液(150 mU / mL):
将100μL测定缓冲液(组分B)加入到谷氨酸氧化酶标准品(冻干,组分E)的小瓶中以制备150mU / mL谷氨酸氧化酶(GO)标准溶液。

 

2.标准溶液

谷氨酸氧化酶标准
将30μL150mU/ mL GO标准溶液加入420μL测定缓冲液(组分B)中,得到10mU / mL GO标准溶液(GO7)。 取10 mU / mL GO标准溶液进行1:3连续稀释,得到剩余的连续稀释的GO标准品(GO6-GO1)。

 

3.工作溶液

将20μLDelterite Red储备液(250X),12.5μLHRP储备溶液(400X)和12.5μL谷氨酸储备溶液(400X)加入5 mL分析缓冲液(组分B)中,使总体积为5.07 mL谷氨酸氧化酶工作溶液(GO工作溶液),避光。

 

样品分析

表1.固体黑色96孔微孔板中GO标准品和测试样品的布局。 GO =谷氨酸氧化酶标准品(GO1-GO7,0.01至10mU / mL),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
GO1 GO1 ... ...
GO2 GO2 ... ...
GO3 GO3    
GO4 GO4    
GO5 GO5    
GO6 GO6    
GO7 GO7    

表2.每个孔的试剂组成。 较高浓度的GO可能由于Amplite Red(对非荧光产物)的过度氧化而导致荧光信号降低

容积 试剂
GO1-GO7 50ul 连续稀释(0.01至10 mU / mL)
BL 50ul 分析缓冲液(组分B)
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备GO标准品(GO),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向GO标准品,空白对照品和测试样品的每个孔中加入50μLGO工作溶液,使总GO测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLGO工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应30至60分钟,避光。

4.用荧光板读数器在激发= 530-570nm,发射= 590-600nm(最佳Ex / Em = 540 / 590nm),截止= 570nm监测荧光强度。 注意:也可以将板的内容物转移到白色透明底板上,并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。 与荧光读数相比,吸收检测具有较低的灵敏度。

 

参考文献

Extracellular polymeric substrates of Chlorella vulgaris F1068 weaken stress of cetyltrimethyl ammonium chloride on ammonium uptake
Authors: Feng Li, Yangduo Kuang, Na Liu, Fei Ge
Journal: Science of The Total Environment (2019)

< 返回前一个页面 >





联系方式
手机:15926423062
电话:15926423062
手机访问官网

15926423062

武汉科斯坦生物科技有限公司 版权所有(C)2022  XML 技术支持: 食品商务网   盖德化工网  

武汉科斯坦生物科技有限公司