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Amplite 发光法过氧化酶检测试剂盒
物品单位 价格 品牌
2604 AAT Bioquest
  • 产地:American
  • 型号:1 kit
  • 货号:CS11559
  • 发布日期: 2022-03-01
  • 更新日期: 2022-03-24
产品详细说明
产地 American
品牌 AAT Bioquest
货号 CS11559
用途范围 Research Grade
纯度 98%%
CAS编号
规格 1 kit
是否进口
简要概述

Amplite 发光法过氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶 的试剂盒,过氧化酶是常用于与抗体按4:1比例结合的小分子(MW ~40 KD)。由于分子量小,因此在与抗体、抗原结合形成复合物时不会带来空间阻碍。与其它酶标签相比过氧化酶更便宜。主要它的主要缺点是在保护剂(例如叠氮化钠)存在的条件下溶解性低,在低浓度下,过氧化酶的活性低。HRP偶联物是广泛用作ELISA(酶联免疫吸附实验)、免疫组化技术、Northern、 Southern和Western blot分析的第二个检测试剂。Amplite生物发光法过氧化酶检测试剂盒提供了一种快速(10分钟)HRP一步法均衡的、无需洗脱的分析方案。本试剂盒可以用于ELISAs,酶促反应动力学分析,氧化酶抑制剂高通量筛选等。试剂盒经过最优化处理,并且可用于高通量液体处理设备。

 

适用仪器


发光酶标仪  
推荐孔板: 白色孔板


产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备HRP工作溶液(50μL)
2.添加HRP标准品和/或测试样品(50μL)
3.在室温下孵育30分钟至2小时
4.监测发光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 HRP原液(20 U / mL):
将1mL含有0.1%BSA的PBS加入到辣根过氧化物酶(组分C)的小瓶中。

 

2.标准溶液

HRP标准
在1999μL含0.1%BSA的PBS中加入1μL20U / mL HRP储备液,得到10 mU / mL HRP标准溶液(PS7)。 然后使用10 mU / mL标准溶液并进行1:2连续稀释以获得剩余的连续稀释的标准品(PS6-PS1)。

 

3.工作溶液

将30μL3%稳定的H2O2溶液(组分B)加入5mL分析缓冲液(组分A)中以制备HRP工作溶液并避光。 注意:HRP工作溶液在室温下稳定至少8小时,如果避光,不会造成活性损失。

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中HRP标准品和测试样品的布局。 PS =过氧化物酶标准品(PS1-PS7,0.156至10mU / mL),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
PS1 PS1 ... ...
PS2 PS2 ... ...
PS3 PS3    
PS4 PS4    
PS5 PS5    
PS6 PS6    
PS7 PS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
PS1-PS7 50ul 连续稀释(0.156至10 mU / mL)
BL 50ul PBS含0.1%BSA
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备HRP标准品(PS),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向HRP标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLHRP工作溶液,使总HRP测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLHRP工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应30分钟至2小时,避光。

4.使用标准光度计监测发光强度。

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