Amplite 荧光法法丙二醇（MDA）定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料 。丙二醛（MDA）是脂质过氧化过程中的天然副产物之一。它被广泛用作确定氧化应激的可靠生物标志物，MDA的定量是评估病理生理过程中氧化应激的必不可少的方法。Amplite 荧光丙二醛（MDA）定量试剂盒提供了一种新的方法来测量MDA，而无需基于TBARS的MDA分析所需的加热步骤。MDA Green 可以与MDA反应，以方便的96孔或384孔板形式增强绿色荧光信号。与其他商用MDA分析试剂盒不同，该分析功能强大且对MDA具有特异性，几乎不受其他醛的干扰。

样品实验方案

简要概述

1. 准备MDA标准品或测试样品（50 μL）
2. 添加MDA Green 工作溶液（50 μL）
3. 在室温下孵育6分钟
4. 添加MDA终止液（50 μL）
5. 检测Ex / Em = 480/555 nm的荧光强度

溶液制备

储备溶液

1. MDA标准溶液（100 mM）：将100μL ddH₂O加入MDA标准溶液（组分C）的样品瓶中，制成100 mM MDA标准溶液。
2. MDA Green 储备溶液（250 X）：将20μL DMSO（组分E）添加到一小瓶MDA Green （组分A）中，制成MDA Green 储备溶液。注意：制备后，所有储备溶液应储存在-20^oC下。避免重复冻融循环。

标准溶液

将10 μL 100 mM MDA标准溶液加到990 μL MDA分析缓冲液（组分B）中，以生成1000 μM MDA标准溶液（MDA7）。取1000 μM MDA标准溶液（MDA7）并进行1：3连续稀释，以得到带有MDA分析缓冲液（组分B）的系列稀释MDA标准溶液（MDA6- MDA1）。

工作溶液

MDA Green 工作溶液：将20μL 250 X MDA Green 储备溶液添加到5 mL MDA分析缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成MDA Green 工作溶液。 注意：该MDA Green 工作溶液应在实验前准备好，并避免光照。

样品分析

表1. 96孔透明底微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品（MDA1-MDA7,6.25至400μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1. 根据表1和2中提供的布局，准备MDA标准品（MDA），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 μL试剂，而不是50 μL。
   
2. 将50 μL MDA Green 工作溶液添加到MDA标准品，空白对照和测试样品的每个孔中。对于384孔板，请在每个孔中添加25 μL MDA Green™工作溶液。
   
3. 在避光条件下，于室温下孵育反应5-6分钟。
   
4. 向反应的每个孔中加入50 μL MDA终止溶液（组分D）。对于384孔板，向每个孔中添加25 μL MDA终止液（组分D）。
   
5. 使用荧光板读数器在Ex / Em = 480/555 nm（截止= 530 nm）处检测荧光强度。

参考文献

Glutathione peroxidase and malondialdehyde in children with chronic hepatitis C
Authors: Khedr, M. A., El-Araby, H. A., Konsowa, H. A., Sokar, S. S., Mahmoud, M. F., Adawy, N. M., Zakaria, H. M.
Journal: Clin Exp Hepatol (2019): 81-87

Malondialdehyde Assay in the Evaluation of Aspirin Antiplatelet Effects
Authors: Polzin, A., Dannenberg, L., Schneider, T., Knoop, B., Naguib, D., Helten, C., Pohl, M., Kelm, M., Zeus, T., Hohlfeld, T.
Journal: Pharmacology (2019): 23-29

Status of malondialdehyde, catalase and superoxide dismutase levels/activities in schoolchildren with iron deficiency and iron-deficiency anemia of Kashere and its environs in Gombe State, Nigeria
Authors: Sharif Usman, S., Dahiru, M., Abdullahi, B., Abdullahi, S. B., Maigari, U. M., Ibrahim Uba, A.
Journal: Heliyon (2019): e02214

The Evaluation of Glutathione Reductase and Malondialdehyde Levels in Patients With Lumbar Disc Degeneration Disease
Authors: Bakirezer, S. D., Yaltirik, C. K., Kaya, A. H., Yilmaz, S. G., Ozdogan, S., Billur, D., Isbir, T.
Journal: In Vivo (2019): 811-814

Association between dietary and metabolic factors and IgM antibodies to phosphorylcholine and malondialdehyde in patients with systemic lupus erythematosus and population-based matched controls
Authors: Lourdudoss, C., Ajeganova, S., Frostegard, J.
Journal: Clin Exp Rheumatol (2018): 428-433

Autoimmune reactivity to malondialdehyde adducts in systemic lupus erythematosus is associated with disease activity and nephritis
Authors: Hardt, U., Larsson, A., Gunnarsson, I., Clancy, R. M., Petri, M., Buyon, J. P., Silverman, G. J., Svenungsson, E., Gronwall, C.
Journal: Arthritis Res Ther (2018): 36

Elevated serum levels of malondialdehyde and cortisol are associated with major depressive disorder: A case-control study
Authors: Islam, M. R., Islam, M. R., Ahmed, I., Moktadir, A. A., Nahar, Z., Islam, M. S., Shahid, S. F. B., Islam, S. N., Islam, M. S., Hasnat, A.
Journal: SAGE Open Med (2018): 2050312118773953

Estimation of malondialdehyde levels in serum and saliva of children affected with sickle cell anemia
Authors: Baliga, S., Chaudhary, M., Bhat, S., Bhansali, P., Agrawal, A., Gundawar, S.
Journal: J Indian Soc Pedod Prev Dent (2018): 43-47

Evaluation of correlation between expression of P53 and Malondialdehyde levels in prostate cancer patients
Authors: Arif, M., Rashid, A., Majeed, A., Qaiser, F., Razak, S.
Journal: J Pak Med Assoc (2018): 1373-1377

Malondialdehyde-acetaldehyde antibody concentrations in rheumatoid arthritis and other rheumatic conditions
Authors: Mikuls, T. R., Duryee, M. J., Engl and B. R., Anderson, D. R., Hearth-Holmes, M., Su, K., Michaud, K., Payne, J. B., Sayles, H., Hunter, C., McGowan, J. D., Klassen, L. W., Thiele, G. M.
Journal: Int Immunopharmacol (2018): 113-118