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Amplite 比色法氨定量试剂盒 蓝色
物品单位 价格 品牌
2604 AAT Bioquest
  • 产地:American
  • 型号:200 Tests
  • 货号:CS10059
  • 发布日期: 2022-03-01
  • 更新日期: 2022-03-25
产品详细说明
产地 American
品牌 AAT Bioquest
货号 CS10059
用途范围 Research Grade
纯度 98%%
CAS编号
规格 200 Tests
是否进口
简要概述

Amplite 比色法氨定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料 。氨是氮在生命系统中的一个重要来源。它是通过氨基酸代谢和合成的,以高浓度的形式存在。氨在血液中(高氨血症)水平升高的肝功能障碍(肝硬化)已被发现,而hypoammonemia已经与在尿素循环酶(例如,鸟氨酸转)的缺陷相关联。氨的测定在临床实验室是非常有用的测试,以监测健康状况。我们Amplite 比色法氨测定试剂盒提供了一种简单、灵敏的测色方法,氨浓度在食品和生物样品(如血清,血浆和尿液等)测定是基于氨的测定中的酶偶联反应的定量缓冲液中,并最终产生蓝色产物。产生的颜色强度正比于氨的样品中的浓度,可以用比色法在660-670 nm处进行测定。这Amplite 比色法氨检测试剂盒提供了一个简单的实验来检测氨。该测定可以在方便的96孔或384孔微量滴定板格式来执行和容易适应不分离步骤实现自动化。

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 660nm-670nm
推荐孔板: 透明底板


产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备氯化铵标准品或测试样品(50μL)
2.添加分析缓冲液I(50μL)
3.在室温或37°C孵育5分钟
4.添加分析缓冲液II(50μL)
5.在室温下孵育30-60分钟
6.监测吸光度增加到660 - 670 nm

 

溶液制备 

1.标准溶液

1.1氯化铵标准
将1μL1.0M氯化铵标准品(组分C)加入999μLDPBS中,生成1000μM氯化铵标准溶液(AS7)。 取1000μM氯化铵标准溶液(AS7),进行1:3连续稀释,得到连续稀释的氯化铵标准品(AS6-AS1)和DPBS。

 

 

样品分析

表1.在96孔微孔板中的氯化铵标准品和测试样品的布局。 AS =氯化铵标准品(AS1-AS7,1至1000μM),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1 ... ...
AS2 AS2 ... ...
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释液(1至1000μM)
BL 50ul DPBS
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局制备氯化铵标准品(AS),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向每个氯化铵标准品,空白对照和测试样品的孔中加入50μL测定缓冲液I(组分A),使总测定体积为100μL/孔。对于384孔板,在每个孔中加入25μL测定缓冲液I,总体积为50μL/孔。

3.将反应在室温或37℃下孵育5分钟。

4.向每个孔中加入50μL测定缓冲液II(组分B)以使总测定体积为150μL/孔。对于384孔板,每孔加入25μLAssayBuffer II,总体积为75μL/孔。

5.在室温下孵育反应30-60分钟。

6.用吸光度酶标仪在660-670nm处监测吸光度的增加。注意:加入分析缓冲液II(组分B)后颜色变为黄色,含氯化铵标准品的孔或样品孵育后会显示蓝绿色。颜色的强度将在30-60分钟内达到最大值。

 

参考文献

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Journal: BMJ Case Rep (2013)

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Effect of Helicobacter pylori eradication on blood ammonia levels in cirrhotic patients: a systematic review
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Is there in vivo evidence for amino acid shuttles carrying ammonia from neurons to astrocytes
Authors: Rothman DL, De Feyter HM, Maciejewski PK, Behar KL.
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