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Amplite 比色法尿素定量试剂盒 蓝色
物品单位 价格 品牌
2604 AAT Bioquest
  • 产地:American
  • 型号:200 Tests
  • 货号:CS10058
  • 发布日期: 2022-03-01
  • 更新日期: 2022-03-25
产品详细说明
产地 American
品牌 AAT Bioquest
货号 CS10058
用途范围 Research Grade
纯度 98%%
CAS编号
规格 200 Tests
是否进口
简要概述

Amplite 比色法尿素定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料 。尿素是动物蛋白质和氨基酸代谢的最终降解产物。它在肝脏中产生,由肾'脏分泌并通过尿液排泄。尿素的测定在临床实验室中用于监测健康状况是非常有用的。血尿'素'氮(BUN)测试是尿素形式的血液中氮的量的量度,主要用于肌酸酐测试,以评估肾功能,帮助诊断肾'脏疾病。我们的Amplite 比色尿素分析试剂盒提供了一种简单灵敏的比色法,用于定量生物样品中的尿素浓度,如血清,血浆和尿液等。该分析基于尿素在分析缓冲液中的酶偶联反应,最后生产出蓝色的产品。产生的颜色强度与样品中尿素的浓度成比例,其可以在660-670nm处比色测量。这种Amplite 比色尿素分析试剂盒提供了一种简单的分析方法,可在150μL分析体积中检测低至10μM的尿素。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行,并且易于适应自动化而无需分离步骤。


适用仪器


光吸收酶标仪
吸收: 665nm
推荐孔板: 透明底板


产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备尿素标准品或测试样品(50μL)
2.添加尿素工作液(50μL)
3.在室温或37°C孵育30-60分钟
4.添加分析缓冲液II
5.读取665 nm处的吸光度

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. Assay Enzyme Mix储备液(100X):
将100μLddH2 O加入到测定酶混合物(组分A)的小瓶中以制备100X测定酶混合物储备溶液。

2.标准溶液

2.1尿素标准
将1μL1.0M尿素标准品(组分D)加入999μLDPBS中以产生1.0mM标准尿素溶液(US7)。 取1.0mM尿素标准溶液进行1:3连续稀释,得到剩余的尿素标准溶液(US6-US1)。

3.工作溶液

将50μL重构的测定酶混合物储备溶液(100X)加入5mL测定缓冲液I(组分B)中以制备尿素工作溶液。 注意:尿素工作溶液应及时使用,避光。 随着储存时间的延长,测定灵敏度会降低。 建议使用新鲜尿素工作溶液以获得最佳效果。

样品分析

表1.透明底部96孔微孔板中尿素标准品和测试样品的布局。 US =尿素标准(US1-US7,1至1000μM),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
US1 US1 ... ...
US2 US2 ... ...
US3 US3
US4 US4
US5 US5
US6 US6
US7 US7

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
US1-US7 50ul 连续稀释液(1至1000μM)
BL 50ul DPBS
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备尿素标准品(US),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向尿素标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL尿素工作溶液,使总尿素测定体积为100μL/孔。对于384孔板,在每个孔中加入25μL尿素工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温或37°C下孵育反应30-60分钟,避光。

4.向每个孔中加入50μL测定缓冲液II(组分C),使得总测定体积为150μL/孔。对于384孔板,向每个孔中加入25μL测定缓冲液II(组分C),总测定体积为75μL/孔。

5.在室温下孵育10-15分钟,并使用吸光度酶标仪监测660-670nm处的吸光度增加。注意:添加分析缓冲液II(组分C)后颜色变为黄色,孵育后尿素标准品或样品孔将显示蓝绿色。颜色的强度将在15-30分钟内达到最大值,并且与尿素的浓度成比例。注意:最终颜色在室温下稳定约1小时,颜色强度会随时间降低。


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