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ReadiUse 预激活的APC-iFluor 800串联染料
物品单位 价格 品牌
4368 AAT Bioquest
  • 产地:American
  • 型号:1 mg
  • 货号:CS2572
  • 发布日期: 2022-03-01
  • 更新日期: 2022-03-28
产品详细说明
产地 American
品牌 AAT Bioquest
货号 CS2572
用途范围 Research Grade
纯度 98%%
CAS编号
规格 1 mg
是否进口
简要概述

藻蓝蛋白(APC)是一种蓝藻藻螺旋藻中分离的藻胆蛋白。像其他藻胆蛋白一样,APC是荧光的,具有极高的吸收率和高量子效率。我们的APC-iFluor 800串联探针拥有一种独特的荧光团,具有用于光谱流式细胞术的IR发射。它的发射光谱不与任何常见的荧光团重叠,从而为流式细胞术中的多色应用提供了独特的颜色。 ReadiUse 预活化的APC-iFluor 800串联蛋白是一种活化的APC蛋白,可以轻松偶联到抗体上,具有比常规APC串联更高的结合产率。



产品说明书

样品分析方案

使用Buccutite MTA制备预激活的抗体

1.在DMSO中以约10 mg / mL的浓度重新配制Buccutite MTA。
注意,请将未使用的Buccutite MTA储存在-20°C下,并且最多可以使用两个冷冻和融化循环。
2.制备浓度大于1 mg / mL的pH = 8.5-9.0缓冲液中的目标抗体(Ab)。
3.以8-10 μg Buccutite MTA / 100 μg Ab的比例将Buccutite MTA添加到Ab溶液中。
4.充分混合并在室温下反应60分钟,在反应过程中旋转。
5.用脱盐柱纯化反应混合物,以除去未反应的Buccutite MTA,并将缓冲液更换为PBS或您选择的缓冲液。
6.收集Buccutite MTA活化的Ab,并以原始起始量的70%产率估算浓度。

 

预激活的APC-iFluor 800串联染料

1.在100 μL ddH2O中将预活化的APC-iFluor 800串联染料重构为10 mg / mL。
注意,重建的预激活APC-iFluor 800串联染料可以在4°C下保存一个月,并避免光照。
2.以130 μg APC-iFluor 800串联染料 / 100 μg MTA激活的Ab的比例直接将APC-iFluor 800串联染料加入MTA激活的目标Ab溶液中。
3.在室温下将混合物离心60分钟。
4.Ab / APC-iFluor 800串联缀合物已经可以使用了。
注意,抗体缀合物应在载体蛋白(例如0.1%牛血清白蛋白)和0.02%-0.05%叠氮化钠存在的情况下以> 0.5 mg / mL的浓度保存。 Ab / APC-iFluor 800串联缀合物溶液可以在4°C下保存长达两个月,并避免光照。
(可选)Ab / APC-iFluor 800串联缀合物可以通过尺寸排阻色谱法(SEC)进一步纯化以获得最佳性能。

 

参考文献

Flow cytometry APC-tandem dyes are degraded through a cell-dependent mechanism.
Authors: Le Roy, Christine and Varin-Blank, Nadine and Ajchenbaum-Cymbalista, Florence and Letestu, Rémi
Journal: Cytometry. Part A : the journal of the International Society for Analytical Cytology (2009): 882-90

Cy7PE and Cy7APC: bright new probes for immunofluorescence.
Authors: Roederer, M and Kantor, A B and Parks, D R and Herzenberg, L A
Journal: Cytometry (1996): 191-7

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