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DNase I, RNase-free
物品单位 价格 品牌
300 Chemstan
  • 产地:China
  • 型号:1KU
  • 货号:CSME0108
  • 发布日期: 2022-05-09
  • 更新日期: 2022-05-11
产品详细说明
产地 China
品牌 Chemstan
货号 CSME0108
用途范围 Research Grade
纯度 >95% as determined by SDS-PAGE%
CAS编号
规格 1KU
是否进口

产品概述


DNaseⅠ(脱氧核糖核酸酶Ⅰ),即DeoxyribonucleaseⅠ,是一种可消化单链或双链DNA的脱氧核糖核酸内切酶,它识别并切割磷酸二酯键,产生5'端为磷酸基团,3'端为羟基的单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸。DNaseⅠ的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子Mg2+、Mn2+等激活。在Mg2+存在的情况下,该酶可随机识别并切割双链DNA任意一条链上的任意位点;而在Mn2+存在的情况下,可识别并切割DNA两条链上几乎相同的位点,产生平末端或有1 - 2个核苷酸突出的粘末端DNA-片段。


保存条件
-30 ~ -15℃保存。运输条件:≤0℃。
单位定义
37℃ 10 min,将能够完全降解1 μg pUC19质粒DNA所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制
纯度:≥90%;
RNase残留检测:使用100 U本品,参照RNaseAlert QC System说明书未检测到RNase残留;
功能检测:投入500 ng 人源基因组DNA,经1 U DNaseⅠ处理后,进行两对质控引物的qPCR检测,清除效率>99.9%。
适用场景
适用于RNA提取、体外转录、RT-PCR实验中DNA的去除,DNaseⅠ印迹(DNaseⅠ footprinting),缺口平移 (nicktranslatioin),DNA随机片段文库构建等分子生物学实验。
注意事项
1. 在使用本品进行RNA样品中DNA的清除实验时,可在反应体系中添加Murine RNase Inhibitor以保护RNA不被降解。
2. 部分实验条件下,DNaseⅠ的最佳使用量需要通过实验进行调整。
3. 失活或抑制:加入终浓度为5 mM的EDTA并经过65℃加热10 min,或通过酚氯仿抽提可使DNaseⅠ失活。此外,使用金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子,0.1%的SDS,DTT、巯基乙醇等还原剂,50 - 100 mM以上盐浓度均对DNaseⅠ的活性有显著抑制作用。
应用实例
体外转录后模板DNA的去除
1. 每0.5 μg模板DNA的转录反应体系中加入1 U DNaseⅠ;
2. 用移液枪轻轻吹打混匀,37℃ 15 min;
3. 酚/氯仿抽提失活DNaseⅠ。



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