1、产品概述
GelRed 是一种可以替代溴化乙锭(EB)的新型核酸染料，具有灵敏度高，毒性低，热稳定性强等诸多优势，对微量DNA，尤其是微量小分子 DNA 具有更高的检测灵敏度。经本品染色的 DNA 条带在紫外光透射下呈现红色荧光，适用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的 dsDNA、ssDNA 及 RNA 染色。
2、保存条件
15 ~ 25℃避光保存，室温运输。
3、产品特点
1) 安全无毒：独特的油性大分子特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内，艾姆斯氏试验结果也表明该染料的诱变性远
小于 EB。
2) 灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响较小。
3) 稳定性高：适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶；室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定，耐光性强。
4) 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
5) 操作简单：在预制胶和电泳过程中不降解，可直接用紫外光凝胶透射仪观察。
6) 适用范围广：可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法)；适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳；可
用于 dsDNA、 ssDNA 或 RNA 染色。
7) 完美兼容：与 EB 有相同的光谱特性，无需改变滤光片及观察装置：标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用，使用与观察 EB 相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可，在 300nm 紫外光附近可得到最佳激发。但是 GelRed 不能被488nm 离子激光器或相似波长的可见光完全激发，因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。
4、注意事项
1) 由于 GelRed 具有良好的热稳定性，可以在热的琼脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷却。摇晃振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将 GelRed 储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中，然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。 GelRed 兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
2) 使用预先加入染色剂制备的琼脂糖凝胶，每次不易加入太多的 DNA 样品，否则容易造成饱和现象，您可以做多个不同浓度的 DNA 标准( Marker)，以确定最佳 DNA 加载量。如果总是看到条带弥散或分离不理想，建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在，则说明问题与染料无关，请尝试：降低琼脂糖浓度；选用更长的凝胶；延长凝胶时间以保证边缘清晰；改进上样技巧或选择泡染法染色。
3) GelRed 对玻璃器皿和非聚丙烯材料具有一定的亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
4) 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶，对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
5、试验流程
A. 琼脂糖凝胶电泳
1. 泡染法(电泳后胶染色，推荐使用)
a. 配制适合浓度的琼脂糖凝胶，根据胶浓度称量相应质量的 Agarose (如 1%，即 1 g 琼脂糖加入 100 ml 1 × TAE)。
b. 使用微波炉加热，直至琼脂糖完全熔化。
c. 将琼脂糖溶液倒入制胶模中，在适当位置处插入梳齿，于室温下凝固(大约 30 - 60 min)。
d. 待检测样品中加入终浓度为 1 × 的 Loading buffer 后，按照常规方法上样电泳。
e. 使用 0.1 M NaCl 溶液稀释 GelRed 染液至 3 × 染色液(15 μl 10,000 × GelRed 染液加入到 50 ml 0.1 M NaCl 溶液
中，该染液可重复使用 3 次，室温避光保存) 。
f. 将凝胶放入合适的容器中，缓慢加入 3 × GelRed 染色液，室温孵育 15 - 30 min，轻轻摇晃。
g. 凝胶浓度越高，厚度越厚，所需染色时间越长。
2. 染胶法（电泳前胶染色，使用方法同 EB,推荐样品量<400 ng DNA 时使用 ）
a. 配制适合浓度的琼脂糖凝胶，根据胶浓度称量相应质量的 Agarose（如1%，即 1 g 琼脂糖加入 100 ml 1 × TAE ）。
b. 使用微波炉加热，直至琼脂糖完全熔化。
c. 直接加入 GelRed，使用终浓度为 1 ×（即 100 ml 凝胶中加入 10 μl 10,000 × GelRed）。
d. 将含有 GelRed 染液的琼脂糖溶液倒入制胶模中，在适当位置处插入梳齿，于室温下凝固(大约 30 - 60 min)。
e. 待检测样品中加入终浓度为 1 × 的 Loading buffer 后，按照常规方法上样电泳。
B. 聚丙烯酰胺凝胶电泳
泡染法(电泳后胶染色)
a. 配制适合浓度的聚丙烯酰胺凝胶。
b. 按照常规方法上样电泳。
c. 使用 0.1 M NaCl 溶液稀释 GelRed 染液至 3 × 染色液(15 μl 染液加入到 50 ml 0.1 M NaCl 溶液中，该染液可重复
使用 3 次，4℃避光保存一周)。
d. 将凝胶放入合适的容器中，缓慢加入 3 × GelRed 染色液，室温孵育 15 - 30 min，轻轻摇晃。
e. 胶浓度越高，厚度越厚，所需染色时间越长。
