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GelRed 核酸染料
物品单位 价格 品牌
676 Chemstan
  • 产地:China
  • 型号:500 μL
  • 货号:CSEP1308
  • 发布日期: 2022-05-11
  • 更新日期: 2022-05-12
产品详细说明
产地 China
品牌 Chemstan
货号 CSEP1308
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号
规格 500 μL
是否进口
1、产品概述

GelRed 是一种可以替代溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,具有灵敏度高,毒性低,热稳定性强等诸多优势,对微量DNA,尤其是微量小分子 DNA 具有更高的检测灵敏度。经本品染色的 DNA 条带在紫外光透射下呈现红色荧光,适用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的 dsDNA、ssDNA 及 RNA 染色。

2、保存条件
15 ~ 25℃避光保存,室温运输。
3、产品特点
1) 安全无毒:独特的油性大分子特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明该染料的诱变性远
小于 EB。
2) 灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响较小。
3) 稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。
4) 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
5) 操作简单:在预制胶和电泳过程中不降解,可直接用紫外光凝胶透射仪观察。
6) 适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可
用于 dsDNA、 ssDNA 或 RNA 染色。

7) 完美兼容:与 EB 有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置:标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用,使用与观察 EB 相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在 300nm 紫外光附近可得到最佳激发。但是 GelRed 不能被488nm 离子激光器或相似波长的可见光完全激发,因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。

4、注意事项
1) 由于 GelRed 具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将 GelRed 储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。 GelRed 兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
2) 使用预先加入染色剂制备的琼脂糖凝胶,每次不易加入太多的 DNA 样品,否则容易造成饱和现象,您可以做多个不同浓度的 DNA 标准( Marker),以确定最佳 DNA 加载量。如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
3) GelRed 对玻璃器皿和非聚丙烯材料具有一定的亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
4) 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
5、试验流程
A. 琼脂糖凝胶电泳
1. 泡染法(电泳后胶染色,推荐使用)
a. 配制适合浓度的琼脂糖凝胶,根据胶浓度称量相应质量的 Agarose (如 1%,即 1 g 琼脂糖加入 100 ml 1 × TAE)。
b. 使用微波炉加热,直至琼脂糖完全熔化。
c. 将琼脂糖溶液倒入制胶模中,在适当位置处插入梳齿,于室温下凝固(大约 30 - 60 min)。
d. 待检测样品中加入终浓度为 1 × 的 Loading buffer 后,按照常规方法上样电泳。
e. 使用 0.1 M NaCl 溶液稀释 GelRed 染液至 3 × 染色液(15 μl 10,000 × GelRed 染液加入到 50 ml 0.1 M NaCl 溶液
中,该染液可重复使用 3 次,室温避光保存) 。
f. 将凝胶放入合适的容器中,缓慢加入 3 × GelRed 染色液,室温孵育 15 - 30 min,轻轻摇晃。
g. 凝胶浓度越高,厚度越厚,所需染色时间越长。
2. 染胶法(电泳前胶染色,使用方法同 EB,推荐样品量<400 ng DNA 时使用 )
a. 配制适合浓度的琼脂糖凝胶,根据胶浓度称量相应质量的 Agarose(如1%,即 1 g 琼脂糖加入 100 ml 1 × TAE )。
b. 使用微波炉加热,直至琼脂糖完全熔化。
c. 直接加入 GelRed,使用终浓度为 1 ×(即 100 ml 凝胶中加入 10 μl 10,000 × GelRed)。
d. 将含有 GelRed 染液的琼脂糖溶液倒入制胶模中,在适当位置处插入梳齿,于室温下凝固(大约 30 - 60 min)。
e. 待检测样品中加入终浓度为 1 × 的 Loading buffer 后,按照常规方法上样电泳。
B. 聚丙烯酰胺凝胶电泳
泡染法(电泳后胶染色)
a. 配制适合浓度的聚丙烯酰胺凝胶。
b. 按照常规方法上样电泳。
c. 使用 0.1 M NaCl 溶液稀释 GelRed 染液至 3 × 染色液(15 μl 染液加入到 50 ml 0.1 M NaCl 溶液中,该染液可重复
使用 3 次,4℃避光保存一周)。
d. 将凝胶放入合适的容器中,缓慢加入 3 × GelRed 染色液,室温孵育 15 - 30 min,轻轻摇晃。
e. 胶浓度越高,厚度越厚,所需染色时间越长。

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