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Cas14a1
物品单位 价格 品牌
2090 Tolo Bio
  • 产地:China
  • 型号:100 pmoL
  • 货号:32119
  • 发布日期: 2022-06-13
  • 更新日期: 2022-06-14
产品详细说明
产地 China
品牌 Tolo Bio
货号 32119
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号
规格 100 pmoL
是否进口

产品简介

Cas14a1 核酸酶是一种内切核酸酶,其在 tracrRNA:crRNA(或 sgRNA)的引导下,特异结合并切 割靶标 ssDNA,且无需 PAM 位点。相比于其他的 Cas 蛋白,Cas14 蛋白的分子量普遍较小(400- 700AA),其中,本公司提供的 Cas14a1 的分子量仅为为 64.9 kd(含有 3.4 k 的 N 端标签序列)。 与 Cas12 类似,Cas14a1 也可以结合靶标核酸并激活其 ssDNA 反式切割活性,从而被应用于靶标核 酸的分子检测。然而,与 Cas12 不同的是,Cas14a1 只能结合 ssDNA 靶标,因此:经过扩增富集的 靶标核酸需使用 T7 核酸外切酶进行处理,且其中一条扩增引物需要实验磷硫酰化修饰以确保 T7核 酸外切酶仅切割其中一条链,从而留下 ssDNA 靶标链以用于 Cas14a1 介导的分子检测。更详细的 信息可参见论文(PMID: 30337455)。

产品组成

产品货号
CS32119-01
CS32119-02

Cas14a1 Nuclease

100 pmol (10 pmol/μL)
1000 pmol (10 pmol/μL)
10× Cas14 Buffer
1 mL
1 mL ×2
Control Target ssDNA (1 μM)
5 μL
5 μL
Control tracrRNA:crRNA (10 μM)
5 μL
5 μL
ssDNA reporter (FAM-HBQ1) (10μM)
5 μL
5 μL
注:crRNA 应保存于-80 °C 以防止降解。
推荐反式切割体系(20 μL):

组分
体积

10× Cas14 Buffer

10 μM tracrRNA:crRNA

10 μM Cas14a1 Nuclease

1 μM Target ssDNA

10 μM ssDNA reporter

Nuclease-free water up to

2μL

1-2 μL

0.5 μL

0.5-1 μL

0.5 μL

20 μL

在冰水浴上混合后,利用荧光定量PCR仪或荧光酶标仪进行检测。Control中的ssDNA reporter为FAM荧光标记。若靶标核酸为扩增的双链DNA,则需在体系中添加T7核酸外切酶。

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