产品简介

来自 S. pyogenes 的 Cas9 核酸酶是依赖于 RNA 介导的内切核酸酶，可以特异地切割双链 DNA（在 DNA PAM 存在的情况下，也可以切割单链 DNA 或单链 RNA）。Cas9 切割位点位于目标序列 （target sequence）内，离 PAM（NGG）区 3 个碱基。PAM 对于 Cas9 的识别和切割都是必需的。 因为反应需要添加 RNA（sgRNA 或者 crRNA:tracrRNA），整个体系，包括 Cas9 酶都不能含有任 何 RNase 活性。其中，Cas9 中的 HNH 和 RuvC 结构域分别负责切割靶标 DNA 中与 sgRNA 配对和 非配对的链。在本产品中，Cas9 的 H840 和 D10 都被突变为 A，使 Cas9 的 HNH 和 RuvC 结构域均 失活，获得 dCas9 蛋白。因此，dCas9 只有结合靶标 DNA 的活性，而没有切割靶标 DNA 的活性。