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2× P6 High-Fidelity Premix
物品单位 价格 品牌
430 Tolo Bio
  • 产地:China
  • 型号:1 mL
  • 货号:21805
  • 发布日期: 2022-06-13
  • 更新日期: 2022-06-14
产品详细说明
产地 China
品牌 Tolo Bio
货号 21805
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号
规格 1 mL
是否进口

产品简介

2×P6 High-Fidelity Premix 是将 PCR 反应用到的超保真 P6 DNA 聚合酶、buffer、dNTP Mixture 以及稳定剂以 2 倍的终浓度进行混合。使用时,只需在制品溶液中加入模板和引物便可进行 PCR反应,大大简化了操作过程, 降低了 pcr操作过程中污染的可能性。P6 High-Fidelity DNA Polymerase 是基于 Pyrococcus furiosus 的高温 DNA 聚合酶,具有耐热型 5′-3′ 的聚合酶活力以及 3′-5′的核酸外切酶活力,因此属于高保真 DNA 聚合酶(其保真度 达到普通 Taq 酶的 55 倍)。该酶经过生物工程改造后,其扩增能力、保真度都得到极大提升,并且具有广泛 的模板适应性,扩增速度达到 2-4 kb/min。优化的 Premix 针对 λ DNA 等简单模板的有效扩增长度可达 40 kb, cDNA 有效扩增长度可达 15 kb,基因组有效扩增长度可达 20 kb。

保存

预混液应置于-20 ℃保存,避免反复冻融。

产品质控

(1)性能检测 1: 在 50 μL PCR 反应体系加入 25 μL premix、100 ng Human RP11 13M9-pBACe3.6 质粒,扩增 15 kb 的 DNA 目的片段,在 30 个循环扩增后经 1%琼脂糖凝胶检测可在 15 kb 处检测到非常亮且单一的目的条带。

(2)性能检测 2: 在 50 μL PCR 反应体系加入 25 μL premix、大肠杆菌菌落,扩增 5 kb 的 DNA 目的片段,在 30 个循环扩增 后经 1%琼脂糖凝胶检测可在 5 kb 处检测到较亮的单一目的条带。

(3)大肠杆菌核酸残留检测: 在 20 μL 荧光定量 PCR 反应体系加入 10 μL premix(无染料)和大肠杆菌特异基因扩增引物(如 gapA); 在不加入大肠杆菌 DNA 模板的情况下,20 个循环内荧光信号值在基线范围。

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