产地 | China |
品牌 | Tolo Bio |
货号 | CC96315 |
用途范围 | Research Grade |
纯度 | % |
规格 | 10 ×100ul |
是否进口 | 否 |
产品简介
发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(Agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够 感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。K599 发根农杆菌(NCPPB2659)含 有 pRi2659 质粒,具有广泛的宿主范围(葫芦科,豆科,茄科等),同时具有链霉素抗性。本公司 生产的 K599 化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,pCAMBIA2301 质粒(卡那霉素 抗性)检测, 转化效率≥ 103 cfu/μg DNA。
存储条件
-80 ℃保存; 请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
除 Ri 质粒 pRi2659 外,无外源质粒 DNA 残留
化学法转化效率≥103 cfu/μg。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,在手心融化成冰水混合物,置于冰水浴中;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,用手拨打管底混匀,依次于冰上静置 10 分钟、液氮 5 分钟(或干冰乙醇浴和-80℃冰冻)、37 ℃水浴 5 分钟、冰浴 5 分钟;
3.加入 900 μl 无抗生素的 YEB 液体培养基,于 28℃振荡培养 2~3 小时;
4. 6000 rpm 离心一分钟收菌,留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 YEB 平板 上,倒置放于 28 ℃培养箱培养 2-3 天。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. K599 具有链霉素抗性,不适用于选择链霉素抗性基因质粒的转化;
4.本公司测试显示该菌株能够耐受氨苄青霉素,建议勿使用选择氨苄抗性基因质粒的转化。
参考文献:
1 Mankin S, et al. 2007. Disarming and sequencing of Agrobacterium rhizogenes strain K599 (NCPPB2659) plasmid pRi2659. In Vitro Cell Dev Biol Plant 43:521–535.
2 Jose V, et al. 2016. Draft Genome Sequence of Agrobacterium rhizogenes Strain NCPPB2659. Genome Announc 4: e00746-16.
15926423062
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