产地 | China |
品牌 | Tolo Bio |
货号 | CC96172 |
用途范围 | Research Grade |
纯度 | % |
规格 | 10 ×100ul |
是否进口 | 否 |
产品简介
T7 Express LysY/Iq 菌株适合于高效转化和蛋白表达的化学活性大肠杆菌细胞。laclq 对表达的严格 控制允许克隆潜在毒性基因,溶菌酶控制 T7 RNA 聚合酶可以表达毒性基因,LysY 是 T7 溶菌酶 的一个变体,缺乏任何酰胺酶活性,因此细胞在诱导过程中对裂解不太敏感。溶菌酶/lacIq 质粒的 维持不需要抗生素选择,缺乏蛋白酶 Lon 和 OmpT 。抗噬菌体 T1( fhuA2)。不限制甲基化 DNA(McrA-、McrBC-、EcoBr-m-、Mrr-)。经 pUC19 质粒转化检测,T7 Express LysY/Iq 感受态细 胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA。
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
除 pRARE 外,无外源质粒 DNA 残留;
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。
15926423062
武汉科斯坦生物科技有限公司 版权所有(C)2024 XML 技术支持: 盖德化工网 食品商务网
武汉科斯坦生物科技有限公司