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T7 Express 感受态细胞
物品单位 价格 品牌
360 Tolo Bio
  • 产地:China
  • 型号:10 ×100ul
  • 货号:CC96159
  • 发布日期: 2022-06-13
  • 更新日期: 2022-06-15
产品详细说明
产地 China
品牌 Tolo Bio
货号 CC96159
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号
规格 10 ×100ul
是否进口

产品简介 

T7 Express 菌株为大肠杆菌 BL21 增强型菌株,为 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型,主要适用于含有 T7 启动子的原核表达载体(如 pET 等)的蛋白表达,同样适用于需要利用大肠杆菌自身 RNA 聚合酶来转录 RNA 的非 T7 启动子的表达载体(如 pGEX 等)。该菌株区别于 BL21(DE3)菌株的优势在于 T7 RNA 聚 合酶基因整合在细菌染色体上的 lac 操纵子区域,基因组中无 λ 前噬菌体序列,并具有抗 T1 噬菌体感 染等特点。T7 Express 表达感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19 质粒检测转化效率大于 108 cfu/μg DNA。

产品组成

基因型:fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT gal sulA11 R(mcr-73::miniTn10--TetS )2 [dcm] R(zgb-210::Tn10- - TetS ) endA1 (mcrC-mrr)114::IS10

存储条件 

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 

质量控制 

无外源质粒 DNA 残留; 

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。 

使用方法 

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化; 

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min; 

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min; 

4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min; 

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。 

注意事项 

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用; 

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10; 

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可; 

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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