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NovaBlue (DE3) 感受态细胞
物品单位 价格 品牌
500 Tolo Bio
  • 产地:China
  • 型号:10 ×100ul
  • 货号:CC96125
  • 发布日期: 2022-06-13
  • 更新日期: 2022-06-15
产品详细说明
产地 China
品牌 Tolo Bio
货号 CC96125
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号
规格 10 ×100ul
是否进口

产品简介 

NovaBlue(DE3)来源于 K12 菌株,具有极高的转化效率,是转化效率最高的原核表达菌株,可同时 用于普通质粒的构建和蛋白的原核表达。NovaBlue(DE3)菌株染色体 DNA 中整合了噬菌体 λDE3 序 列,使得 NovaBlue(DE3)菌株可用于 pET 系列、pGEX、pMAL 等质粒的蛋白表达。NovaBlue(DE3) 菌株具有四环素抗性,endA1 和 recA1 的突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取; lacZΔM15 突变使得 NovaBlue(DE3)可用于蓝、白斑实验筛选。经 pUC19 质粒转化检测,NovaBlue (DE3)感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA 以上。 

产品组成 

基因型:F - [proA+ B + lacIq Z M15::Tn10 (TetR )] endA1 hsdR17(rk12 - mk12 + ) supE44 thi -1 recA1 gyrA96 relA1 lac (DE3)

存储条件 

-80 ℃保存,请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。 

质量控制 

无外源质粒 DNA 残留; 

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。 

使用方法 

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min; 

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min; 

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min; 

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。 

注意事项 

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用; 

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10; 

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可; 

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。 

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