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Lemo21(DE3) 感受态细胞
物品单位 价格 品牌
360 Tolo Bio
  • 产地:China
  • 型号:10 ×100ul
  • 货号:CC96169
  • 发布日期: 2022-06-13
  • 更新日期: 2022-06-15
产品详细说明
产地 China
品牌 Tolo Bio
货号 CC96169
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号
规格 10 ×100ul
是否进口

产品简介 

大肠杆菌 Lemo21(DE3)感受态细胞为 T7 可控表达菌株,专为表达具有挑战性的重组蛋白而设计。 它作为 BL21(DE3)的衍生菌株,不仅继承了其特点,还能够通过改变 T7 溶菌酶(lysY)的水平以 控制表达水平, T7 溶菌酶为 T7 RNA 聚合酶的天然抑制剂。对蛋白表达的精准控制使得 Lemo21(DE3) 成为表达膜蛋白、毒性蛋白、分泌蛋白以及存在可溶性问题蛋白的理想选择。 Lemo21(DE3)感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19 质粒检测转化效率>108 cfu/μg DNA。 

产品组成 

基因型:fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3) [dcm] ?hsdS/ pLemo(CamR )DE3 = λ sBamHIo ?EcoRI-B int::(lacI::PlacUV5::T7 gene1) i21 ?nin5 pLemo = pACYC184-PrhaBAD-lysY 

产品特性 

-BL21(DE3)的增强型菌株; - 精准的表达调控; - 在 T7 菌株中表达范围最宽; - 消除了形成包涵体的潜在可能。 

存储条件 

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制 

无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。 

使用方法 

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化; 

2. 将待转化 DNA 加入到 100μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30min; 

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min; 

4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min; 

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。 

注意事项 

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用; 

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10; 

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可; 

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。


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