产地 | China |
品牌 | Tolo Bio |
货号 | CC96194 |
用途范围 | Research Grade |
纯度 | % |
规格 | 10 ×100ul |
是否进口 | 否 |
产品简介
BL21 是最早开发的用于原核表达的菌株,BL21(DE3)、Rosetta、OrigamiB(DE3) 等一系列原核表达 菌株均来源于 BL21 菌株。该菌株主要用于非毒性蛋白的表达,不含 T7 RNA 聚合酶,所以不能用 于由 T7 启动子驱动的蛋白表达(如:pET 系列);但含有大肠杆菌 RNA 聚合酶,可以用于 tac 或 trc 等使用大肠杆菌 RNA 聚合酶的原核系统的表达(如:pGEX,pMAL 质粒)。BL21 感受态细胞由特 殊工艺制作,pUC19 质粒检测转化效率达 107 cfu/μg DNA。
产品组成
基因型:E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB - mB - ) gal [malB+ ]K-12(λS )
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
产品特性
BL21 感受态细胞是用来作为表达载体的宿主。适用于毒性蛋白的表达,适用于 Tac 启动子系统,如: pGEX, pMAL。 质量控制 无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC19 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90 s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min; 5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。
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