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ArcticExpress(DE3) pRARE2感受态细胞
物品单位 价格 品牌
360 Tolo Bio
  • 产地:China
  • 型号:10 ×100ul
  • 货号:CC96184
  • 发布日期: 2022-06-13
  • 更新日期: 2022-06-15
产品详细说明
产地 China
品牌 Tolo Bio
货号 CC96184
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号
规格 10 ×100ul
是否进口

产品简介 

ArcticExpress (DE3) pRARE2 来源于 ArcticExpress (DE3),将具有氯霉素抗性的 pRARE2 质粒导入 ArcticExpress (DE3)细胞中即是 ArcticExpress (DE3) pRARE2。ArcticExpress (DE3) pRARE2 菌株染 色体 DNA 中整合了 λ 噬菌体 DE3 区,使得 ArcticExpress (DE3) pRARE2 菌株可同时表达 T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶,广泛用于 pET 系列, pGEX,pMAL 等质粒的蛋白表达。 ArcticExpress (DE3) pRARE2 菌株具有四环素,庆大霉素,氯霉素抗性;endA1 突变有利于质粒 DNA 的稳定。[cpn10cpn60 GentR ]的存在使 ArcticExpress (DE3) pRARE2 可以表达适应低温的伴侣 蛋白 Cpn10 和 Cpn60(来自嗜冷菌—Oleispira antarctica)。Cpn10 和 Cpn60 伴侣蛋白在 4-12 ℃表现出 较高活性,在 ArcticExpress(DE3) pRARE2 细胞中表达时,可降低重组蛋白包涵体的形成,增加可溶重 组蛋白的表达量及生物活性,比传统的原核表达伴侣蛋白 GroEL、GroES 等具有更加优异的促融能力。 同时,pRARE2 质粒可补充大肠杆菌缺乏的 7 种稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA 和 CGG)对应的 tRNA,提高外源基因的表达水平。吐露港生产的 ArcticExpress (DE3) pRARE2 感受态 细胞经特殊工艺制作,pUC19 质粒检测转化效率达 108 cfu/μg DNA。

产品组成

基因型:E. coli B F ompT hsdS (rB mB ) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [cpn10cpn60 GentR ] pRARE2 (CamR )

存储条件 

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 

质量控制 

除 pRARE2 外,无外源质粒 DNA 残留; 

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。 

使用方法 

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化; 

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min; 

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min; 

4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min; 

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。 

注意事项 

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用; 

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10; 

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可; 

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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