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Stbl3化学感受态细胞
物品单位 价格 品牌
240 Tolo Bio
  • 产地:China
  • 型号:10 ×100ul
  • 货号:CC96134
  • 发布日期: 2022-06-13
  • 更新日期: 2022-06-15
产品详细说明
产地 China
品牌 Tolo Bio
货号 CC96134
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号
规格 10 ×100ul
是否进口

产品简介 

Stbl3 菌株来源于大肠杆菌 HB101 菌株,是慢病毒载体系统推荐使用的菌株。基因组带有重组酶 recA13 突变,可有效抑制长片段末端重复区的重组,降低错误重组的概率;但由于菌株不含核酸 酶 endA1 突变,因此体内核酸酶含量较高,在提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中的去蛋白液进 行处理,否则抽提出的质粒很不稳定,易降解。此菌株具有链霉素抗性,不存在 lacI qZΔM15,不 可用于蓝/白斑筛选实验。经 pUC19 转化检测,Stbl3 感受态细胞的效率可达 108 cfu/μg DNA。

产品组成

基因型:F - mcrB mrr hsdS20(rB - mB - ) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20 (StrR ) xyl-5 λleu mtl1 endA1+

存储条件 

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 

产品特性 

-属于大肠杆菌 K 株系列,主要用于目标基因的克隆和质粒的保存;不可用于以 T7 RNA 聚合酶为 表达系统的蛋白表达; 

-该菌株适合克隆不稳定插入片段,甲基化的基因组序列,以及慢病毒载体的构建。 

质量控制 

无外源质粒 DNA 残留; 

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。 

使用方法 

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min; 

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90 s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min; 

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项 

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用; 

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10; 

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可; 

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。 

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