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JM330感受态细胞
物品单位 价格 品牌
340 Tolo Bio
  • 产地:China
  • 型号:10 ×100ul
  • 货号:CC96186
  • 发布日期: 2022-06-13
  • 更新日期: 2022-06-15
产品详细说明
产地 China
品牌 Tolo Bio
货号 CC96186
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号
规格 10 ×100ul
是否进口

产品简介 

JM330 菌株(即 DH5α T1 Phage Resistant),来源于 DH5α 菌株;通过在 DH5α 大肠杆菌基因组中引入 了 tonA 突变获得,因而具有抵抗噬菌体 T1 和 T5 的能力。JM330 菌株最大的特点是其可以在体内 特异性降解甲基化的质粒模板,被广泛应用于 DNA 定点突变实验(即反应产物在转化之前无需再 进行 DpnI 酶切处理)。JM330 菌株缺失核酸内切酶 (endA1)和重组酶(recA1),提高了质粒 DNA 的 产量和质量; lacZΔM15 的存在使 JM330 可用于蓝、白斑筛选实验。经 pUC19 质粒转化检测, JM330 感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA 以上。

产品组成

基因型:F - φ80 lacZ?M15 ?(lacZYA-argF) U169 recA1 endA1 hsdR17 (rK - mK + ) phoA supE44 λ - thi-1 gyrA96 relA1 tonA

存储条件 

-80 ℃保存,请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 

质量控制 

无外源质粒 DNA 残留; 

化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。 

使用方法 

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min; 

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90 s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min; 

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min; 

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。 

注意事项 

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用; 

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10; 

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可; 

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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