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Mach1 T1感受态细胞
物品单位 价格 品牌
240 Tolo Bio
  • 产地:China
  • 型号:20 ×100ul
  • 货号:CC96106
  • 发布日期: 2022-06-13
  • 更新日期: 2022-06-15
产品详细说明
产地 China
品牌 Tolo Bio
货号 CC96106
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号
规格 20 ×100ul
是否进口

产品简介 

大肠杆菌 Mach1 T1 菌株由野生型 E. coli W 菌株改造而来,是目前生长速度较快的感受态细胞之一, 在平板上 培养 8 h 可见克隆;该菌缺失了核酸内切酶(endA),提高了质粒 DNA 的产量和质量; 重组酶缺陷型(recA1398)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入外源 DNA 的稳定性;菌株 携带 lacZΔM15 突变,故可用于蓝、白斑筛选;tonA 突变赋予 Mach1 T1 菌株对噬菌体 T1 和 T5 的 抗性。经 pUC19 质粒转化检测,Mach1 T1 感受态细胞的转化效率可达 109 cfu/μg DNA。

产品组成

基因型:F - φ80(lacZ)ΔM15 ΔlacX74 hsdR (rK - mK + ) ΔrecA1398 endA1 tonA

存储条件 

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 

质量控制 无外源质粒 DNA 残留; 

化学法转化效率≥109 cfu/μg pUC19 DNA。 

使用方法 

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min; 

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90 s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min; 

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min; 

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。 

注意事项 

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用; 

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10; 

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可; 

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。 

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