产地 | China |
品牌 | Tolo Bio |
货号 | CC96147 |
用途范围 | Research Grade |
纯度 | % |
规格 | 10 ×100ul |
是否进口 | 否 |
产品简介
MG1655 菌株来源于 W1485,是 K12 的衍生菌株,是一种经过较少改造、比较接近于“野生型”的大肠杆 菌工程菌株。MG1655 外观形态标准,既可做为扩增大肠杆菌野生型基因的模板使用,也可作为蛋白表 达的宿主菌株使用;但该菌株不含核酸酶 endA1 突变,因此体内核酸酶含量较高:提取质粒时务必使用 质粒提取试剂盒中的去蛋白液处理,以尽量去除核酸酶,否则提取的质粒很容易被 降解。经 pUC19 质粒转化检测,MG1655 感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA。
产品组成
基因型:K12 Fλ - ilvGrfb-50 rph-1
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留;
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。
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