物品单位 | 价格 | 品牌 |
---|---|---|
支 | 240 | Tolo Bio |
产地 | China |
品牌 | Tolo Bio |
货号 | CC96104 |
用途范围 | Research Grade |
纯度 | % |
CAS编号 | |
规格 | 10 ×100ul |
是否进口 | 否 |
产品简介
大肠杆菌 JM110 菌株具有硫酸链霉素抗性(StrR );是甲基化基因 dam、dcm 缺失的菌株,从该菌株 中提取得到的质粒 DNA ,可被对 dam 和 dcm 甲基化敏感的内切酶切割;该菌株携带的 lacI q lacZΔM15 突变使其可以进行蓝白斑筛选。但由于该菌株的转化效率不太高,一般不用于质粒 构建的宿主,而是用于质粒转化以便进行质粒去甲基化。经 pUC19 质粒转化检测,JM110 感受态 细胞的转化效率可达 107 cfu/μg DNA 以上。
产品组成
基因型:rpsL (StrR ) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacIq lacZΔM15]
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留;
化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC19 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。
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