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HB101化学感受态细胞
物品单位 价格 品牌
240 Tolo Bio
  • 产地:China
  • 型号:10 ×100ul
  • 货号:CC96174
  • 发布日期: 2022-06-13
  • 更新日期: 2022-06-15
产品详细说明
产地 China
品牌 Tolo Bio
货号 CC96174
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号
规格 10 ×100ul
是否进口

产品简介 

HB101 菌株是 E. coli K-12 菌株和 E. coli B 菌株的杂合产物(同时也是 Stbl3 的原始菌株)。该菌株携带 recA13 突变,可有效抑制长片段末端重复区的重组,降低错误重组的概率;但由于其不含核酸酶 endA1 突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中的去蛋白液以去除 核酸酶。hsdS20 背景使 HB101 缺失内切酶系统,增强了外源 DNA 的稳定性和提取质量;此菌株 具有链霉素抗性;不存在 lacIq ZΔM15,不可用于蓝、白斑筛选。经 pUC19 质粒转化检测,HB101 感受态细胞的转化效率可达 107 cfu/μg DNA。

产品组成

基因型:F - mcrB mrr hsdS20 (rB - mB - ) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20 (StrR ) glnV44 λ

存储条件 

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 

质量控制 

无外源质粒 DNA 残留; 

化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC19 DNA。 

使用方法 

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min; 

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min; 

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min; 

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。 

注意事项 

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用; 

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10; 

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可; 

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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