产地 | China |
品牌 | Tolo Bio |
货号 | CC96177 |
用途范围 | Research Grade |
纯度 | % |
规格 | 10 ×100ul |
是否进口 | 否 |
产品简介
EPI400 来源于 EC100 菌株,将 EC100 核基因中控制质粒拷贝数的 pcnB 基因改造成诱导型启动子驱动 后获得了 EPI400 菌株。EPI400 菌株可以显著降低大部分质粒的拷贝数,特别适合于各种含不稳 定 DNA 的质粒或含有毒性基因的克隆;在加入 CopyMore 400 诱导剂后可将质粒的拷贝数提高至正常 状态。mcrA 突变和 mrr-hsdRMS-mcrBC 缺失的基因型使得 EPI400 菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲 基腺嘌呤的 DNA 。recA1 和 endA1 突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。 lacZΔM15 标记的存在使 EPI400 可用于蓝白斑筛选,tonA 突变赋予其抗噬菌体 T1 和 T5 的能力, rpsL 突变赋予其链霉素抗性。经 pUC19 质粒转化检测,EPI400 感受态细胞的转化效率可达 107 cfu/μg DNA。
产品组成
基因型:F - mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 lacX74 recA1 endA1 araD139 (ara, leu)7697 galU galK λ - rpsL (StrR ) nupG trfA tonA pcnB dhfr
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留
化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC19 DNA
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。
15926423062
武汉科斯坦生物科技有限公司 版权所有(C)2024 XML 技术支持: 盖德化工网 食品商务网
武汉科斯坦生物科技有限公司