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DH12S化学感受态细胞
物品单位 价格 品牌
240 Tolo Bio
  • 产地:China
  • 型号:10 ×100ul
  • 货号:CC96128
  • 发布日期: 2022-06-13
  • 更新日期: 2022-06-16
产品详细说明
产地 China
品牌 Tolo Bio
货号 CC96128
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号
规格 10 ×100ul
是否进口

产品简介

大肠杆菌 DH12S 来源于 DH10B,可用于生产特别纯的单链 DNA;同时,M13KO7 辅助噬菌体可 用来生成单链 DNA。由于该菌株是 endA+基因型,其所生产的单链 DNA 中很少污染双链 DNA。在 F′ 中表达的 LacI 蛋白可以调控 lac 启动子的表达。此外,由于消除了 mcrA,mcrBC,mrr,hsdRMS 等限 制系统,该菌株可以高效地克隆大部分基因组序列。DH12S 带有 lacZΔM15 突变,可以进行蓝白斑筛选 实验。经 pUC19 质粒转化检测,DH12S 感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA。

产品组成

基因型:mcrA (mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 lacX74 recA1 deoR Δ(ara, leu)7697 araD139 galU galK rpsL F' [proAB+ lacIq ZΔM15]

存储条件

-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;

5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;

3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;

4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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