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重组赖氨酰内切酶(生化级)
物品单位 品牌
Chemstan
  • 产地:China
  • 型号:按客户需求
  • 货号:CSDP314
  • 发布日期: 2022-07-11
  • 更新日期: 2022-07-11
产品详细说明
产地 China
品牌 Chemstan
货号 CSDP314
用途范围 Research Grade
纯度 单一主条带(SDS-PAGE)%
CAS编号
规格 按客户需求
是否进口


产品简介

赖氨酰内切酶(LaiAnXianNeiQieMei)又称赖氨酰肽链内切酶Lys-C 内切酶,是一种丝氨酸蛋白酶,开始是由Masaki等人从土壤细.菌中发现并分离得到。该酶具有高度特异性,可特异性切割赖氨酸残基和 S-氨乙 基半胱氨酸残基羧基端的肽键。也有报道称具有微量的非特异性切割。该酶是蛋白质序列分析和生物制品生产 中非常珍贵的工具酶。该酶可单独使用,也可以与其它蛋白酶一起使用,经过消化的蛋白可用于肽图谱分析以 及目的蛋白的制备。 本品是从重组大肠杆菌中分离纯化,再经冷冻干燥得到的重组赖氨酰内切酶粉末。

本品属于生物化学级别 的基.因工程酶,不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑.制.剂,具有兲然赖氨酰内切酶相同的活.力和特异性。

产品特性


性状

白色或类白色冻 干粉

酶比活.性

≥3.0AU/mg pro.

分子量 29.2 kDa±2.9kDa

纯度

单一主条带(SDS-PAGE)

蛋白含量 30%~70%
外源 DNA 残留量
≤100ng/mg pro.
菌体蛋白残留量
≤100ng/mg pro.

蕞佳pH

8.5~9.5

溶解性 在缓冲液中溶解性良好

酶活定义: 30℃, pH9.5 条件下,每分钟催化底物生成 1μmol 对硝基苯胺的酶量为 1AU。

推荐使用方法

【蛋白质的准备】

将蛋白质溶解在 25mM Tris-HCl,pH9.2 的溶液中。溶解性低或者需要变性处理的蛋白质可以用最小体积的 变性剂,如 8M 尿素或 6M 盐酸胍,在 25℃~37℃条件下孵育 1h 使之溶解。需要做二硫键还原处理的蛋白质 可以加入终浓度为 5mM 的 DTT 或β-巯基乙.醇,于 50~60℃孵育 20 分钟使之溶解。 调整反应溶液体积使 Tris-HCl 为 25mM,尿素为 1M 或更低,盐酸胍为 0.1M 或更低。

【酶液准备】

称取所需的酶粉,用 25mM Tris-HCl (pH 9.2)溶解,使酶液浓度为 1-10mg/ml。

【消化反应】

1g 多肽或蛋白质推荐酶的用量在 1~100AU 之间。推荐于25~37℃反应 2~18h。 如果需要终止反应,可以加入乙酸或盐酸调节 pH 至酸性。

【注意】 为了获得最.佳的酶切效果,通常需要蛋白处于可溶、变性和二硫键还原的状态,否则需要加大酶用量。 应严格控制盐酸胍和尿素的加入量,尿素高于 1M 或盐酸胍高于 0.1M将会降低重组赖氨酰内切酶的活力。

产品用途

生物制品的生产,如胰岛素及类似物生产,GLP-1 类似物生产。

小分子蛋白或多肽的生产,如美容肽,抗.菌肽、食品风味肽的生产等。

Lys-X 化合物的酶催化合成。

干细胞、原代细胞的培养,作用更加温和。

运输和储存稳定性

运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定。

储存稳定性:冻 干粉在-15~-20℃条件下至少能稳定存放24个月。1mM盐酸或50mM醋酸溶解后储存于-15~-20℃,反复冻融10次,无活.性损失。溶解后 2~8℃保存建议不超过7天 ,溶解后-15~-20℃ 保存建议不超过30天 。

注意事项和免责声明

在 2M 尿素或 0.1%SDS 可保留大部分活力。

本品具有吸潮性,应室温平衡后再取用。

本品仅供研究使用,不得用于动物或人类的诊断或治.疗。



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