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DiO Plus(细胞膜绿色荧光探针升级款)
物品单位 价格 品牌
360 Chemstan
  • 产地:China
  • 型号:5 mg
  • 货号:CSN4021
  • 发布日期: 2022-09-02
  • 更新日期: 2022-09-02
产品详细说明
产地 China
品牌 Chemstan
货号 CSN4021
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号
规格 5 mg
是否进口

DiO Plus(细胞膜绿色荧光探针升级款)

产品货号:CSN4021

产品规格:5 mg

应用范围:细胞膜荧光染料、神经元顺行和逆行示踪、细胞长期示踪


产品参数

外观:可溶于乙醇、己烷、DMSO 或植物油的橙黄色固体 Ex/Em (MeOH) = 484/501 nm

分子式:C67H105ClN2O5S

分子量:1086.0

储存条件: 4℃避光保存,有效期见外包装。


产品介绍

DiO Plus 效能等同于 Neuro-DiO。

DiO Plus 是一种代替膜绿色荧光染料 DiO 的新型染料, DiO 由于其溶解度低、易形成聚合物和横向扩散速度缓慢等 缺点,很难用于神经元和细胞悬液的研究。DiO Plus 和 DiO 具有几乎相同的吸收光谱和发射光谱,但前者具有更好的膜 溶解性,并且不形成非荧光性的聚集体,通常这也会减慢染 料在膜上的扩散速率。

DiO Plus 染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他 试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外, 在固定透化(室温下用 0.1% TritonX-100 透化)后,也可以 很好地进行质膜染色。


使用方法

1. 染色液制备

(1)配置 DMSO 或 EtOH 储存液:储存液用 DMSO 或 EtOH 配置浓度 1~5 mM。 注:未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融。

(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS 或 PBS)稀释储存液,配制浓度为 1~5 μM 的工作液。 注:工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化 建议从推荐浓度的 10 倍范围内开始最优浓度的摸索。

2. 悬浮细胞染色

(1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为 1×106 /mL。

(2)37℃孵育细胞 20 min,不同的细胞最佳培养时间不同。 可以 20 min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一 的标记结果。

(3)孵育结束,1000~1500 rpm 离心 5 min。倾倒上清液, 再次缓慢加入 37℃预热的生长培养液重悬细胞。

(4)重复步骤(3)两次以上。

3. 贴壁细胞的染色

(1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,但表面要 保持湿润。

(3)在盖玻片的一角加入 100 μL 的染料工作液,轻轻晃动 使染料均匀覆盖所有细胞。

(4)37℃孵育细胞 2~20 min,不同的细胞最佳培养时间不 同。可以 20 min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到 均一的标记结果。

(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片 2~3 次,每次用 预温的培养基覆盖所有细胞,孵育 5~10 min,然后吸干培养 基。但要使表面保持湿润。

4. 结果检测

样品可在培养基中进行检测,可以通过荧光显微镜成像 或流式细胞仪分析。


注意事项

1. DiO Plus 染色固定的细胞或组织样品时,样品宜使用配制 在 PBS 中的 4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定 液会导致荧光背景较高。 2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光 淬灭。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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