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DiR(细胞膜近红外荧光探针)
物品单位 价格 品牌
300 Chemstan
  • 产地:China
  • 型号:5 mg
  • 货号:CSD4006
  • cas:100068-60-8
  • 发布日期: 2022-09-02
  • 更新日期: 2022-09-02
产品详细说明
产地 China
品牌 Chemstan
货号 CSD4006
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号 100068-60-8
规格 5 mg
是否进口

DiR(细胞膜近红外荧光探针)

产品货号:D4006

产品规格:5 mg

应用范围:细胞膜染色,细胞融合、粘附和迁移示踪剂,小动物成像


产品参数

外观:可溶于乙醇、DMF 或 DMSO 的深蓝绿色固体 Ex/Em (MeOH) = 748/780 nm

CAS 号:100068-60-8

分子式:C63H101IN2

分子量:1013.4 分子结构图:

储存条件

-20℃避光保存,有效期见外包装。


产品介绍

DiR 是一个亲脂性、近红外荧光花青染料。这个染料常 用于标记细胞质膜。DiR 的两个 18-碳链插入到细胞膜,从 而进行特定  的、稳定的细胞染色,几乎不会发生细胞间的染 料转移。

DiR(近红外荧光)和其他细胞膜荧光染料如 DiI(橙色 荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)配合使用,为 多色成像和流式细胞分析提供了有效的工具。

DiR染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂) 的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定 透化(室温下用0.1% TritonX-100透化)后,也可以很好地进 行质膜染色。


使用方法

1. 染色液制备

(1)配制储液:储液用无水 DMSO 或无水 EtOH 配制,浓 度 1~5 mM。

注:未使用的储液建议分装后储存在-20℃,避免反复冻融。

(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基, HBSS 或 PBS)稀释储液,配制浓度为 1~5 μM 的工作液。 注:工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。 建议从推荐浓度的 10 倍范围内开始最优浓度的摸索。

2. 悬浮细胞染色

(1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为 1×106 /mL。

(2)37℃孵育细胞 2~20 min,不同的细胞最佳培养时间不 同。可以 20 min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到 均一的标记效果。

(3)孵育结束,1000~1500 rpm 离心 5 min。倾倒上清液, 再次缓慢加入 37℃预热的生长培养液重悬细胞。

(4)重复步骤(3)两次以上。

3. 贴壁细胞染色

(1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,但要使表 面保持湿润。

(3)在盖玻片的一角加入 100 μL 的染料工作液,轻轻晃动 使染料均匀覆盖所有细胞。

(4)37℃孵育细胞 2~20 min,不同的细胞最佳培养时间不 同。可以 20 min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记效果。

(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片 2~3 次,每次用 预温的培养基覆盖所有细胞,孵育 5~10 min,然后吸干培养 基。但要使表面保持湿润。

4. 结果检测

样品可在培养基中进行检测,可通过荧光显微镜成像或 流式细胞仪分析。


注意事项

1. DiR 染色固定的细胞或组织样品时,样品宜使用配制在 PBS 中的 4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液 会导致荧光背景较高。

2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光 淬灭。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Note
For research use only

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