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DiA(细胞膜绿色荧光探针)
物品单位 价格 品牌
1300 Chemstan
  • 产地:China
  • 型号:50 mg
  • 货号:CSD4059
  • cas:114041-00-8
  • 发布日期: 2022-09-02
  • 更新日期: 2022-09-02
产品详细说明
产地 China
品牌 Chemstan
货号 CSD4059
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号 114041-00-8
规格 50 mg
是否进口

DiA(细胞膜绿色荧光探针) 

产品货号:CSD4059 

产品规格:50 mg 

应用范围:细胞膜荧光染料,主要用于细胞成像,细胞示踪和追踪 


产品参数 

外观:可溶于 DMSO 的红色固体 

Ex/Em (MeOH) = 491/613 nm 

CAS 号:114041-00-8 

分子式:C46H79IN2 

分子量:787.0 

分子结构图: 

储存条件 

4℃避光保存,有效期见外包装。 


产品介绍 

DiA 是一种细胞膜绿色荧光染料,它在细胞膜中的扩散 速度比 DiO 快,并且经常和 DiI 一起使用于细胞膜双色标 记。 

DiA 染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂) 的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定 透化(室温下用 0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很好地 进行质膜染色。DiA 对固定细胞的染色效果比 DiO 好。 


使用方法 

1. 染色液制备 

(1)配制储液:储液用无水 DMSO、无水 DMF 或 EtOH 配 制,浓度 1~5 mM。DiA 在无水 DMSO 和无水 DMF 中的溶 解度比在 EtOH 中的溶解度高。 注:a.未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融; b.发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进 溶解。 

(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基, HBSS 或 PBS)稀释储液,配制浓度为 1~30 μM 的工作液。 最常用的工作液浓度为 5-10 μM。 注:工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。 建议从推荐浓度的 10 倍范围内开始最优浓度的摸索。 

2. 悬浮细胞染色 

(1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为 1×106 /mL。 

(2)37℃孵育细胞 2~20 min,不同的细胞最佳培养时间不 同。可以 20 min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到 均一的标记效果。 

(3)孵育结束,1000~1500 rpm 离心 5 min。倾倒上清液, 再次缓慢加入 37℃预热的生长培养液重悬细胞。 

(4)重复步骤(3)两次以上。 

3. 贴壁细胞染色 

(1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。 

(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,但要使表 面保持湿润。 

(3)在盖玻片的一角加入 100 μL 的染料工作液,轻轻晃动 使染料均匀覆盖所有细胞。 

(4)37℃孵育细胞 2~20 min,不同的细胞最佳培养时间不 同。可以 20 min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到 均一的标记效果。 

(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片 2~3 次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育 5~10 min,然后吸干培养 基。但要使表面保持湿润。 

4. 结果检测 

样品可在培养基中进行检测,可通过荧光显微镜成像或 流式细胞仪分析。


 注意事项 

1. DiA 染色固定的细胞或组织样品时,样品宜使用配制在 PBS 中的 4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液 会导致荧光背景较高。 

2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光 淬灭。 

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Note
For research use only 

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