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DiO(细胞膜绿色荧光探针)
物品单位 价格 品牌
400 Chemstan
  • 产地:China
  • 型号:10 mg
  • 货号:CSD4007
  • cas:34215-57-1
  • 发布日期: 2022-09-02
  • 更新日期: 2022-09-05
产品详细说明
产地 China
品牌 Chemstan
货号 CSD4007
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号 34215-57-1
规格 10 mg
是否进口

DiO(细胞膜绿色荧光探针) 

产品货号:CSD4007 

产品规格:10 mg 

应用范围:细胞膜荧光染料,主要用于细胞成像,细胞示踪和追踪 


产品参数 

外观:黄色固体。DiO 溶于无水乙醇、无水 DMSO 和无水 DMF,在无水 DMSO 中的溶解度约为 10 mg/mL。较难溶解 时,可以适当加热或者超声处理。 

Ex/Em (MeOH) = 484/501 nm 

CAS 号:34215-57-1 

分子式:C53H85ClN2O6 

分子量:881.7 

分子结构图: 

储存条件 

4℃避光保存,有效期见外包装。 


产品介绍 

        DiO 即 DiOC18(3),是最常用的细胞膜荧光探针之一, 呈现绿色荧光。DiO 是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可 以侧向扩散逐渐染色整个细胞的细胞膜。DiO 在进入细胞膜 之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强, 被激发后可以发出绿色荧光,具有很高的淬灭常数和激发态 寿命,可以用标准的 FITC 滤光片检测。 

        DiO 作为示踪剂或长期示踪剂,被广泛用于正向或逆向 的,活的或固定的神经等细胞或组织。DiO 通常不会显著影 响细胞的生存力。 

        DiO 除了细胞膜荧光标记外,还可用于检测细胞的融合 和粘附,发育或移植过程中的细胞迁移,通过 FRAP(光脱 色荧光恢复技术)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性 和标记脂蛋白等。 

        DiO 染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂) 的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定 透化(室温下用 0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很好地 进行质膜染色。DiO 染色强度通常低于 DiI,有时在固定组 织中会完全丧失。 


使用方法  

1. 染色液制备 

(1)配制储液:储液用无水 DMSO、无水 DMF 或 EtOH 配 制,浓度 1~5 mM。DiO 在无水 DMSO 和无水 DMF 中的溶 解度比在 EtOH 中的溶解度高。 

注:a.未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融; 

       b.发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进 溶解。 

(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基, HBSS 或 PBS)稀释储液,配制浓度为 1~30 μM 的工作液。 最常用的工作液浓度为 5-10 μM。 

注:工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。 建议从推荐浓度的 10 倍范围内开始最优浓度的摸索。 

2. 悬浮细胞染色 

(1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为 1×106 /mL。 

(2)37℃孵育细胞 2~20 min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以 20 min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到 均一的标记效果。 

(3)孵育结束,1000~1500 rpm 离心 5 min。倾倒上清液, 再次缓慢加入 37℃预热的生长培养液重悬细胞。 

(4)重复步骤(3)两次以上。 

3. 贴壁细胞染色 

(1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。 

(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,但要使表 面保持湿润。 

(3)在盖玻片的一角加入 100 μL 的染料工作液,轻轻晃动 使染料均匀覆盖所有细胞。 

(4)37℃孵育细胞 2~20 min,不同的细胞最佳培养时间不 同。可以 20 min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到 均一的标记效果。 

(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片 2~3 次,每次用 预温的培养基覆盖所有细胞,孵育 5~10 min,然后吸干培养 基。但要使表面保持湿润。 

4. 结果检测 

样品可在培养基中进行检测,可通过荧光显微镜成像或 流式细胞仪分析。


 注意事项 

1. DiO 染色固定的细胞或组织样品时,样品宜使用配制在 PBS 中的 4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液 会导致荧光背景较高。 

2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光 淬灭。 

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作


Note
For research use only 

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