15926423062  

产品展厅

Annexin V-PE/RedNucleus Ⅱ 细胞凋亡试剂盒
物品单位 价格 品牌
264 Chemstan
  • 产地:China
  • 型号:10T
  • 货号:CSA6079S
  • 发布日期: 2022-09-02
  • 更新日期: 2022-09-06
产品详细说明
产地 China
品牌 Chemstan
货号 CSA6079S
用途范围 Research Grade
纯度 %
CAS编号
规格 10T
是否进口

Annexin V-PE/RedNucleus Ⅱ细胞凋亡试剂盒 

产品货号:CSA6079S, CSA6079M, CSA6079L 

产品规格:10T, 50T, 100T 

产品内容:

组分

CSA6079S (10T)

CSA6079M (50T)

CSA6079L (100T)

A. 1×Annexin V 结合缓冲液

10 mL

50 mL

50 mL×2

B. Annexin V-PE

50 μL

250 μL

500 μL

C. RedNucleus II 

100 μL

500 μL

mL


储存条件 

4℃避光冷藏,请勿冻存。有效期见外包装。 

Annexin V-PE 储存于 50 mM Tris, 100 mM NaCl, 1% BSA, 0.02% NaN3, pH 7.4 的溶液中。 


光谱特性 

Annexin V-PE:Ex/Em=488/578 nm 

RedNucleus II:Ex/Em=635/695 nm 


产品介绍 

       Annexin V 是一类广泛分布于真核细胞胞浆的钙离子依 赖性的磷脂结合蛋白。Annexin V 则选择性的结合磷脂酰丝 氨酸(Phosphatidylserine, PS),PS 在细胞正常状态下是分 布于细胞磷脂层内侧,即靠近细胞质,当细胞处于早期凋亡 阶段,PS 会从细胞内侧翻转至细胞外侧,此时 Annexin V 可以与 PS 结合,被红色荧光染料 PE 标记的 Annexin V 作 为探针则会在一定波长激发的情况下检测出处于早期凋亡 状态的细胞。对于坏死细胞,由于细胞完整性已经被破坏, Annexin V-PE 则可以进入胞浆与处于磷脂层内侧的 PS 结 合,从而也使坏死细胞呈现红色荧光。 

       本试剂盒中提供的 RedNucleus II 是一种远红光染料, 属于蒽醌类化合物,不能透过活细胞和早期凋亡细胞完整的 细胞膜,是非渗透性的,但是可以快速染色死亡和透化细胞 中的细胞核/dsDNA。RedNucleus II 是一种理想的碘化丙啶 ( PI )和 7-AAD 的替代物,与 PE 联用,无需补偿调节,具 有更好的光谱特性:不受紫外线的激发,也不与 PE/PE 同 系物重叠发射,故可以和 FITC,PE 及紫色荧光染料结合用 于多色分析。与 Annexin V-PE 联用时,RedNucleus II 被排 除在活细胞和早期凋亡细胞外,而晚期凋亡细胞和死细胞则 同时被 Annexin V-PE 和 RedNucleus II 结合染色呈现双阳 性。 

        Annexin V-PE/RedNucleus II 细胞凋亡检测试剂盒可用 流式细胞仪及或其他荧光检测设备进行检测。 


使用方法 

1. 根据实验要求诱导细胞凋亡。检测样品中应包含未经处 理的细胞样品,作为阴性对照。 

2. 沉淀细胞 

悬浮细胞:1000 rpm,离心 5 min。 

贴壁细胞:用不含 EDTA 的胰酶消化后 1000 rpm,离 心 5 min。胰酶消化时间不宜过长,以防引起假阳性。对于 特定的细胞,如果细胞无法完全离心至管底,可以适当延长 离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约 50 μL 左右的培养液,以避免吸走细胞。

注:用胰蛋白酶消化然后使细胞在最佳细胞培养条件和 培养基中恢复约 30 min,然后再染色。胰蛋白酶消化会暂时 破坏质膜,允许 Annexin V 结合磷脂酰丝氨酸在细胞膜的细 胞质表面上,从而导致假阳性染色。 

3. 加入约 1 mL 4℃预冷的 PBS,重悬细胞,1000 rpm,离 心 5 min。 

4. 重复步骤 3。 

5. 用 1×Annexin V 结合缓冲液重悬细胞,调节其浓度为 1-5×10 6细胞/mL。 

6. 取 100 μL 的细胞悬液于 5 mL 流式管中,加入 5 μL Annexin V-PE、5 μL RedNucleus II,混匀后于室温避光孵育 15-20 min。 

7.(可选步骤)准备两管额外的凋亡细胞,每管中只加入一 种单染染料(Annexin V-PE 或 RedNucleus II),用于流式 单染的补偿调节)。 

8. 加入 400 μL 1× Annexin V 结合缓冲液,混匀,进行流式 检测,Annexin V-PE 由 488 nm 激光激发,检测荧光发射光 谱在 578 nm 处(FL2 或 BL2 通道),RedNucleus II 由 638 nm 激发,选择 FL4 或 RL1 通道检测。 


注意事项 

1. 荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注 意避光,以减缓荧光淬灭。 

2. 为了避免洗涤细胞时损失细胞,在吸液时可以用大的 Tip 头套上小的 Tip 头吸液。 

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作


Note
For research use only 

< 返回前一个页面 >





联系方式
手机:15926423062
电话:15926423062
手机访问官网

15926423062

武汉科斯坦生物科技有限公司 版权所有(C)2022  XML 技术支持: 食品商务网   盖德化工网  

武汉科斯坦生物科技有限公司