产品说明
Ec DNA连接酶来源于大肠杆菌，分子量为77,000，催化双链DNA中5’-磷基和3’-羟基之间形成磷酸二酯键的DNA连接酶。作用与T4 DNA Ligase相同，但以NAD+为辅酶。最适反应pH为7.5-8.0 (Tris-HCl buffer)。与T4 DNA Ligase可连接粘性末端和平末端相比，本酶只能催化粘性末端DNA之间的连接，但如果在PEG及高浓度一价阳离子存在的条件下，也能连接平滑末端的DNA。与T4 DNA Ligase能将DNA的5′-P末端与RNA的3′-OH以及RNA的5′-P末端与DNA的3′-OH连接不同，本酶不能催化DNA与RNA以及RNA之间的连接。对单链DNA或RNA和平末端DNA不具有活性。由于当寡核苷酸与互补的靶DNA不完全配对时，也会发生一定比例的连接反应，因此不推荐用于SNPs的精准检测。

活性定义
在 20 μl大肠杆菌DNA 连接酶反应缓冲液中，16℃ 反应条件下，30 分钟能使 50% 的经 HindIII 消化的λ DNA 片段 [5′ 端浓度为 0.12 μM（300μg/ml），DNA总量6μg] 连接所需的酶量，为1个单位。Ec DNA连接酶的单位定义约为Taq DNA连接酶单位定义的40倍。
浓度：10U/μl
保存条件：-20℃。

特点与应用：
1.DNA连接反应，用于基因克隆
2.体外DNA组装拼接实验
3.Okayama-Berg法克隆cDNA

Note
For research use only .