15926423062  

产品展厅

SplintR Ligase
  • 品牌:Chemstan
  • 产地:China
  • 型号:2000U
  • 货号:CS1359A
  • 价格: ¥1000/支
  • 发布日期: 2023-04-23
  • 更新日期: 2024-05-24
产品详请
产地 China
品牌 Chemstan
货号 CS1359A
用途 Research Grade
纯度 >95%
规格 2000U
是否进口
产品说明
SplintR 连接酶也称为PBCV-1 DNA连接酶或Chorella病毒DNA连接酶,在ATP作为辅助因子条件下,在模板RNA链存在下,高效连接与RNA链互补的相邻的DNA的5′磷酸末端和3′羟基末端。被连接的可以是两条DNA单链;也可以是一条DNA的5’端与3’端与RNA模板以环状形式配对,连接成一个环状的DNA单链。因此非常适合基于锁式探针(Padlock probe)或上下游双探针的microRNA检测。锁式探针是一种较长的单链DNA寡核苷酸片段,两个末端和靶标序列毗邻互补,探针中间的一段序列不与靶标序列配对,可以作为通用引物的结合位点。本酶对于平末端、粘性末端的连接、以及双链DNA、双链RNA、DNA/RNA杂交双链中的单链切口都可以连接。SplintR 连接酶的这种活性可以用于miRNAs等微小RNA和mRNA 的检测与单核苷酸多态性SNP分析。在二代测序和分子诊断等众多领域中,SplintR是富集目的基因的理想选择。SplintR连接酶是RNA检测的 用酶,其对RNA介导固定的DNA底物亲和性强(米氏常数 Km = 1 nM),能够在复杂的混合物中检测到亚纳摩尔级的特定RNA。
SplintR 连接酶在广泛条件下,例如10 μM - 1 mMATP,pH 6.5–9.0,均有活性。其中 反应条件为高于5 mM Mg2+,pH 7.5 - 8.0。37°C反应,补充5 mM Mn2+可以提高反应活性。高于100 mM一价阳离子抑制酶活性。相比dA/U碱基对, 5’端dC/G与dG/C 碱基对对连接反应具有部分抑制作用,特别是相邻的碱基对也是C/G的情况。
活性定义
1单位指在温度为25℃,1× SplintR Ligase 反应缓冲体系的条件下,15min内连接50%的2pmol DNA链(与RNA杂交配对形成的带缺口的DNA/RNA底物)所需的酶量。
活性测定条件
50 mM Tris-HCl ,1 mM ATP,10 mM MgCl2,10 mM DTT(pH 7.5 @ 25℃),25℃ 温育。
浓度
25U/μl
保存条件
-20℃保存
特点与适用范围
1. 基于DNA探针连接进行RNA检测
2.SNP或剪接变异检测
3.基于锁式探针(Padlock probe)的microRNA检测
4.互补RNA序列配对的单链DNA连接反应
5. RASL-seq(RNA-mediated oligonucleotide annealing, selection, and ligation with next-generation sequencing)
6.热失活:65℃ 加热20min。
Note
For research use only. Not suitable for clinical or therapeutic use.

< 返回前一个页面 >





联系方式
手机:15926423062
手机访问官网

15926423062

武汉科斯坦生物科技有限公司 版权所有(C)2024  XML 技术支持: 盖德化工网   食品商务网  

武汉科斯坦生物科技有限公司