试剂盒成分
1. 特异性识别 RhoA 活性构象的鼠单克隆抗体（Anti active RhoA, Mouse Monoclonal  Antibody (Catalog No. 26904)）：小管装--30ul (抗体浓度是 1mg/ml)，抗体溶于 PBS（pH7.4）并包含 50%的甘油和 0.05%的叠氮化钠。此抗体可以特异性识别所有脊椎动物中的  RhoA-GTP。
2. Protein A/G agarose (Catalog No. 30301) ：小管装—400ul 包含 200ul Protein A/G agarose和 200ul 20%乙醇溶液。（使用时溶液需要充分混匀，再吸取）
3. 5X Assay/Lysis Buffer (Catalog No. 30303)：小瓶装—30mL 包含 250 mMTris-HCl (pH8.0),750 mM NaCl, 50 mM MgCl2, 5 mM EDTA, 5% Triton X-100。
4. 特异性识别 RhoA 活性构象的兔多克隆抗体（Anti RhoA, Rabbit Polyclonal Antibody
(Catalog No.21009)）：小管装--30ul (抗体浓度是 1mg/ml)，抗体溶于 PBS（pH 7.4包含有 50%的甘油。
5. 100 X GTPγS (Catalog No. 30302) ：小管装—100ul (10 mM) ，实验中 0.5mL 细胞裂解液使用 5ul GTPγS 标记。
6. 100 X GDP (Catalog No. 30304) ：小管装—100ul (100 mM) ，实验中 0.5mL 细胞裂解液使用 5ul GDP 标记。

储存条件
试剂盒的成分在试剂盒的有效期限内必须存放于 4°C 条件下保存。

试剂（试剂盒内不提供，由实验者自行配置）
1. 刺激和未刺激的细胞裂解物；
2. 蛋白酶抑制剂；
3. 4 °C 摇杆或者摇床；
4. 0.5 M EDTA (pH 8.0)；
5. 1 M MgCl2；
6. 2X reducing SDS-PAGE sample buffer；
7. 电泳和免疫印迹相关试剂；
8. 免疫印迹缓冲液 TBST (10 mM Tris-HCl, pH 7.4, 0.15 M NaCl, 0.05%
Tween-20)；
9. 免疫印迹封闭缓冲液 (TBST containing 5% 脱脂奶粉 or 3% BSA)；
10. PVDF 或硝酸纤维素膜； 
11. 二抗；
12. ECL 检测试剂；

试剂制备
1X Assay/Lysis Buffer：实验前用去离子水将 5X 的 Assay/Lysis 缓冲液稀释成 1X 的缓冲液，
并在使用前加入蛋白酶抑制剂如 1 mM PMSF, 10 μg/mL leupeptin（亮肽素），或 10 μg/mL
aprotinin（抑肽酶）。

Note:
For research use only .