JM109-武汉科斯坦生物科技有限公司

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JM109

品牌：Chemstan

产地：China

型号：100 ul

货号：CS107L

价格： ￥2888/支
发布日期： 2023-07-31
更新日期： 2024-04-30

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产品详请

产地	China
品牌	Chemstan
货号	CS107L
用途范围	Research Grade
纯度	95%
规格	100 ul
是否进口	否

产品规格

规格：100 μL/支

pUC19(control vector，100 pg/μL）：5μL

保存条件：-80℃

有效期：6 个月

运输：干冰运输

基因型

endA1 recA1 gyrA96 thi-1 relA1 supE44 hsdR17(rk -，mk+ ) △(lac-proAB)/F' [traD36 proAB+ laqI q

lacZ△M15]

产品说明

JM109 感受态细胞 recA1 和 endA1 的突变有利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提

取。携带 hsdR17 基因型背景，使得异源 DNA 不被内源核酸酶系统降解。lacZ△M15 的存

在使 JM109 可用于构建克隆，蓝白斑筛选实验。JM109 感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19

质粒检测转化效率可达 10 8 cfu/μg DNA。

操作方法

一、热激转化法

1. 从-80℃冰箱取出感受态细胞冰浴融化后，吸取 100 μL 感受态细胞转移到-20℃过夜预

冷的摇菌管中，加入质粒或连接产物，轻轻混匀，冰浴 30 分钟。

2. 42℃ 水浴热激 60 秒，迅速放回冰中并静置 2 分钟，该过程不要摇动摇菌管。

3. 向摇菌管中加入900 μL 37℃温浴的SOC或LB(SOC培养基可提高2-3倍转化效率)，

37℃、

180 rpm、45 分钟复苏菌种。

4. 根据实验要求（质粒、重组连接产物转化），吸取不同体积已转化的感受态细胞加到含

相应抗生素的 LB 培养基上，将细胞均匀涂开。将平板置于 37℃至液体被吸收，倒

置平板，37℃过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放 37℃培养至少 15 小时。

二、10 分钟快速转化法

1. 提前 15 分钟将用到的筛选培养基平板拿到 37℃预热。

2. JM109 感受态细胞从 -80℃ 拿出，迅速插入冰中，5 分钟后待菌块融化，加入目的 DNA

(质粒或连接产物)并用手拨打 EP 管底轻轻混匀，冰中静置 5 分钟。

3. 用200 μL 枪将感受态细胞-DNA 混合物转移到已经37℃ 预热的LB培养基上，涂均匀，

表面无水渍。

4. 将平板倒置放于 37℃ 培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放 37℃培养

至少 15 小时。

? 注意事项

1. 刚刚化冻的细胞，转化效率。

2. 避免反复化冻。

3. 避免移液枪吹吸。

4. 整个操作过程要轻柔。

5. 重组产物不建议用 10 分钟快速转化法。

Note
For research use only.

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