前言
抗性淀粉（RS）是指在人小肠内不能被酶解的淀粉，在大肠部分或完全发酵。RS 是总膳食纤维的组分
之一。
抗性淀粉的测定方法： 样品使用α-胰淀粉酶和淀粉葡糖苷酶（AMG）37℃振荡水浴孵育 16 小时，在这期
间，通过两种酶的联合作用，非抗性淀粉被溶解，水解成 D-葡萄糖，孵育结束后，加入等体积的乙醇或工业甲
基化酒精（IMS,变性乙醇）终止反应。离心上述溶液，收集上清勿弃，底部残留絮状团即为样品中的 RS，用含
水的 IMS 或乙醇（50%v/v）洗涤絮状团，洗涤后离心，再重复一次洗涤离心，收集离心后获得的上清，与之前
收集的上清混合。小心倒出试管残留的液体，将絮状团置于冰水浴中，加入 2M KOH 溶解，溶解的同时用磁力
搅拌机剧烈搅拌。用醋酸盐缓冲液将这个溶液调至中性，用 AMG 将淀粉定量水解成葡萄糖。D-葡萄糖用葡糖
氧化酶/过氧化物酶试剂（GOPOD）测定，这也是对样品中 RS 含量的测定。非抗性淀粉（可溶性淀粉）的测定
可通过集中的上清液并定容至 100ml，再用 GOPOD 测定 D-葡萄糖完成。
应用性和 性
这个方法需要样品中 RS 含量多于 2% w/w，如 RS 含量多于 2% w/w，常规标准误差为±5%，少于 2% w/w RS
的误差更高。
溶液/悬浮液的制备
试剂一的稀释：使用移液枪吸取 2 ml 试剂一溶液用顺丁烯二酸钠缓冲液（100mM pH6.0）稀释至 22ml。
注意：以 5 ml 为单位分装后-20℃保存，反复冻融不会影响其稳定性。
溶液配制
1. 顺丁烯二酸钠（马来酸钠）缓冲液(100mM，pH6.0)含 2mM 二水合 CaCl2和 0.02%叠氮化钠（防腐剂，若没
有该试剂可不添加）：用 1600ml 蒸馏水溶解 23.2g 顺丁烯二酸钠，接着用 NaOH 调节 pH 至 6.0，加入 0.6g 二
水合 CaCl2和 0.4g 叠氮化钠，混合并溶解，定容至 2L。
2. 醋酸钠缓冲液（1.2M，PH3.8）：将 69.6ml 的冰醋酸加至 800 ml 的蒸馏水中，用 NaOH 调节 pH 至 pH3.8，
用蒸馏水定容至 1L。
3. 醋酸钠缓冲液（100mM，PH4.5）：将 5.8ml 的冰醋酸加至 900 ml 的蒸馏水中，用 NaOH 调节 pH 至 4.5，用
蒸馏水定容至 1L。
4. 氢氧化钾溶液（2M）：将 112.2g KOH 加至 900 ml 的去离子水中，搅拌溶解。定容至 1L，密封保存。
5. 50%乙醇：将 500ml 乙醇（95%v/v 或者 99%v/v 加入 500ml 的水中，密封保存
Note
For research use only .