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抗性淀粉检测试剂盒-分光法
  • 品牌:Chemstan
  • 产地:China
  • 型号:50T
  • 货号:KB058
  • 发布日期: 2023-12-08
  • 更新日期: 2024-03-01
产品详请
产地 China
品牌 Chemstan
货号 KB058
用途范围 Research Grade
纯度 %
规格 50T
是否进口
前言
抗性淀粉(RS)是指在人小肠内不能被酶解的淀粉,在大肠部分或完全发酵。RS 是总膳食纤维的组分
之一。
抗性淀粉的测定方法: 样品使用α-胰淀粉酶和淀粉葡糖苷酶(AMG)37℃振荡水浴孵育 16 小时,在这期
间,通过两种酶的联合作用,非抗性淀粉被溶解,水解成 D-葡萄糖,孵育结束后,加入等体积的乙醇或工业甲
基化酒精(IMS,变性乙醇)终止反应。离心上述溶液,收集上清勿弃,底部残留絮状团即为样品中的 RS,用含
水的 IMS 或乙醇(50%v/v)洗涤絮状团,洗涤后离心,再重复一次洗涤离心,收集离心后获得的上清,与之前
收集的上清混合。小心倒出试管残留的液体,将絮状团置于冰水浴中,加入 2M KOH 溶解,溶解的同时用磁力
搅拌机剧烈搅拌。用醋酸盐缓冲液将这个溶液调至中性,用 AMG 将淀粉定量水解成葡萄糖。D-葡萄糖用葡糖
氧化酶/过氧化物酶试剂(GOPOD)测定,这也是对样品中 RS 含量的测定。非抗性淀粉(可溶性淀粉)的测定
可通过集中的上清液并定容至 100ml,再用 GOPOD 测定 D-葡萄糖完成。
应用性和 性
这个方法需要样品中 RS 含量多于 2% w/w,如 RS 含量多于 2% w/w,常规标准误差为±5%,少于 2% w/w RS
的误差更高。
溶液/悬浮液的制备
试剂一的稀释:使用移液枪吸取 2 ml 试剂一溶液用顺丁烯二酸钠缓冲液(100mM pH6.0)稀释至 22ml。
注意:以 5 ml 为单位分装后-20℃保存,反复冻融不会影响其稳定性。
溶液配制
1. 顺丁烯二酸钠(马来酸钠)缓冲液(100mM,pH6.0)含 2mM 二水合 CaCl2和 0.02%叠氮化钠(防腐剂,若没
有该试剂可不添加):用 1600ml 蒸馏水溶解 23.2g 顺丁烯二酸钠,接着用 NaOH 调节 pH 至 6.0,加入 0.6g 二
水合 CaCl2和 0.4g 叠氮化钠,混合并溶解,定容至 2L。
2. 醋酸钠缓冲液(1.2M,PH3.8):将 69.6ml 的冰醋酸加至 800 ml 的蒸馏水中,用 NaOH 调节 pH 至 pH3.8,
用蒸馏水定容至 1L。
3. 醋酸钠缓冲液(100mM,PH4.5):将 5.8ml 的冰醋酸加至 900 ml 的蒸馏水中,用 NaOH 调节 pH 至 4.5,用
蒸馏水定容至 1L。
4. 氢氧化钾溶液(2M):将 112.2g KOH 加至 900 ml 的去离子水中,搅拌溶解。定容至 1L,密封保存。
5. 50%乙醇:将 500ml 乙醇(95%v/v 或者 99%v/v 加入 500ml 的水中,密封保存
Note
For research use only .

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