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抗性淀粉检测试剂盒
  • 品牌:Chemstan
  • 产地:China
  • 型号:100T
  • 货号:KB059
  • 发布日期: 2023-12-08
  • 更新日期: 2024-05-24
产品详请
产地 China
品牌 Chemstan
货号 KB059
用途 Research Grade
纯度 %
规格 100T
是否进口
前言
抗性淀粉(RS)是指在人小肠内不能被酶解的淀粉,在大肠部分或完全发酵。RS 是总膳食纤维的组分之一。

抗性淀粉的测定方法: 样品使用α-胰淀粉酶和淀粉葡糖苷酶(AMG)37℃振荡水浴孵育 16 小时,在这期间,通过两种酶的联合作用,非抗性淀粉被溶解,水解成 D-葡萄糖,孵育结束后,加入等体积的乙醇或工业甲基化酒精(IMS,变性乙醇)终止反应。离心上述溶液,收集上清勿弃,底部残留絮状团即为样品中的 RS,用含水的 IMS 或乙醇(50%v/v)洗涤絮状团,洗涤后离心,再重复一次洗涤离心,收集离心后获得的上清,与之前收集的上清混合。小心倒出试管残留的液体,将絮状团置于冰水浴中,加入 2M KOH 溶解,溶解的同时用磁力搅拌机剧烈搅拌。用醋酸盐缓冲液将这个溶液调至中性,用 AMG 将淀粉定量水解成葡萄糖。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/过氧化物酶试剂(GOPOD)测定,这也是对样品中 RS 含量的测定。非抗性淀粉(可溶性淀粉)的测定可通过集中的上清液并定容至 100mL,再用 GOPOD 测定 D-葡萄糖完成。

应用性和 性
这个方法需要样品中 RS 含量多于 2% w/w,如 RS 含量多于 2% w/w,常规标准误差为±5%,少于 2% w/w RS的误差更高。

溶液/悬浮液的制备

使用瓶子 1 中提供的的产品(试剂一),这个溶液是有粘性的,因此应使用移液器移取分装。(4℃下稳定
性> 3 年)稀释后试剂一:取 2 mL 瓶子 1 中溶液用 100m pH6.0 顺丁烯二酸钠缓冲液稀释至 22mL。(注:以
5 mL 为单位分装后用聚乙烯管冷冻保存,反复冻融不会影响稳定性,稳定性-20℃ >5 年)
没有提供的试剂(应购买分析纯级)
1.顺丁烯二酸钠(马来酸钠)缓冲液(100mM,pH6.0)加上 2mM 二水氯化钙和叠氮化钠(0.02%w/v):用 1600mL
蒸馏水溶解 23.2g 顺丁烯二酸,用 4M(160g/L)氢氧化钠调节 pH 至 6.0,加入 0.6g 二水氯化钙和 0.4g 叠氮化
钠,混合并溶解,定容至 2L。(4℃下可保存一年)
2.醋酸钠缓冲液(1.2M,PH3.8):将 69.6mL 的冰醋酸(1.05g/mL)加至 800 mL 的蒸馏水中,用 4M 氢氧化钠
调节 pH 至 pH3.8,用蒸馏水定容至 1L。(室温下可保存一年)
3.醋酸钠缓冲液(100mM,PH4.5):将 5.8mL 的冰醋酸加至 900 mL 的蒸馏水中,用 4M 氢氧化钠调节 pH 至
4.5,用蒸馏水定容至 1L。(4℃保存 2 个月)
4.氢氧化钾溶液(2M):将 112.2gKOH 加至 900 mL 的去离子水中,搅拌溶解。定容至 1L,密封保存。(室
温下可保存 2 年)
5.含水乙醇(或者 IMS)(大约 50%v/v):将 500mL 乙醇(95%v/v 或者 99%v/v)或者工业甲基化酒精(IMS;
变性乙醇;95% v/v 乙醇加上 5%甲醇)至 500mL 的水中,密封保存。(室温下稳定保存>2 年)
Note
For research use only .

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