15926423062  

产品展厅

HRP快速标记试剂盒(0.5MGX2支标记量)
  • 品牌:Chemstan
  • 产地:China
  • 货号:6210-0.5MGX2
  • 价格: ¥800/盒
  • 发布日期: 2023-12-13
  • 更新日期: 2024-05-24
产品详请
产地 China
品牌 Chemstan
货号 6210-0.5MGX2
用途 Research Grade
纯度 %
是否进口

产品货号:6210-1MGX5

产品名称:HRP快速标记试剂盒(每次标记量可以低到0.1mg)

原理与应用酸钠氧化法活化辣根过氧化物酶(HRP)的糖基,经过活化的HRP带有醛基可以与待标记物的游离氨基结合,发生希夫碱反应(Schiff's base reaction)。本试剂盒适用于带有游离氨基的物质的标记,比如:带有游离氨基(伯胺)的抗体、蛋白或者小分子化合物本试剂盒采用特有稳定技术,活化HRP保存在液体中,吸取方便,可以较小标记量(可以小到100UG),让您的标记工作更易把控和操作!

试剂盒组成:

预活化HRP

5mg(250UL液体/支)

标记启动液   

2ml

反应终止液干粉      

5管(每管可配1ml)

标记物保存液

6ml

备用透析袋(MD6,截留量12KD)

10X5CM

说明书

1份

操作步骤

1.  首先去除待标记抗体或蛋白中的叠氮钠、以及含有氨基的缓冲成分物质,比如甘氨酸、Tris 等还有EDTA等物质可采用透析和超滤的办法置换缓冲液,以去除干扰物质达到较好标记效果!透析或超滤缓冲液尽量选择0.01M CB,PH:9.6缓冲液(说明书附件有经验配方无需调整PH),若实验室没有碳酸盐试剂再采用0.01M PBS(PH:7.0-7.4均可)透析或超滤置换缓冲液,结束后调整抗体或蛋白的浓度到2MG/ML。如果抗体和蛋白不含上述这些干扰物质可以直接用上述PBS或CB缓冲液调整浓度到2MG/ML备用。

2.  4℃取出HRP标记试剂盒,使各组分充分混匀

3. 500ul抗体或蛋白(约1mg)加入50ul预活化HRP(1mg)液体中,用移液枪反复吹打几次混匀混匀后加入HRP标记启动液99ul(加入启动液量依据:每10ul蛋白和HRP混合液加1.8ul启动液)继续混匀数次,避免产生气泡然后避光30-37温箱偶联反应2-3小时若遇快要下班也可放4反应24小时左右(此法效果一样或者更好不必担心)。

4. 偶联结束将反应终止粉管中加入1mL去离子水混匀,取50ul加入3所述反应液中(加入终止液量依据:每1mg HRP加入终止液50ul),充分混匀,室温放置1 小时或者4 2小时。

5. 终止完成后,可直接加入等体积的标记物保存液充分混匀,置于-20℃保存如果想更上长期的保存建议先用0.067M PBS  PH:7.0(说明书附件有经验配方)透析或超滤置换缓冲液后再加标记物保存液。这样可以保存3年左右甚至更长。

注意事项:

1、待标记物缓冲液成分过于复杂以及含有氨基小分子和NAN3的初始缓冲液必须透析或超滤置换掉,请采用0.01M PBS(PH:7.0-7.4均可)0.01M CB,PH:9.6缓冲液均可。

2、如果待标记物不是抗体是其它蛋白,那么请根据分子量参考蛋白和酶用量:若分子量在40KD以上建议1mg蛋白使用1mg HRP;如果分子量在30KD左右,建议1mg蛋白使用1.3mg HRP;如果分子量在20KD左右,建议1mg蛋白使用2mg HRP;如果分子量在10KD左右,建议1mg蛋白使用4mg HRP;此时启动液和终止液请按步骤3和4描述标准适量加入;如果标记量为小于1mg的抗体或蛋白(可以小到0.1mg),HRP和其它试剂加入量按比例折算即可。

3、小分子药物不建议直接标记HRP,因为HRP的结构不能结合足够的药物会造成效价偏低,这种情况建议先偶联BSA增加小分子偶联量再进行HRP标记,这样效果会非常好。

4、如果待标记物含有其它蛋白需要把无关蛋白同样计算进去,尽快如此也请您慎重选择这样的样品进行标记。

5、本试剂盒保存4可以保证1年内开启有效,活化HRP开启后小心取用切勿污染碱性物质

6、终止液干粉一共5支,原则上每一支配好后 一次性使用,因此您可以根据您的实验总量合理配制使用。
Note
For research use only .

< 返回前一个页面 >





联系方式
手机:15926423062
手机访问官网

15926423062

武汉科斯坦生物科技有限公司 版权所有(C)2024  XML 技术支持: 盖德化工网   食品商务网  

武汉科斯坦生物科技有限公司