2×Almighty PCR Mix(Dye Plus)

说明书

产品信息 Products

产品描述 Product overview

2×Almighty PCR Mix是2×预混液，其中包含聚合酶、dNTPs、反应 buffer(含MgCl₂)等成分，使用方便快捷，能减少 PCR 操作过程中的污染。使用时只需取适量 2×Almighty PCR Mix，加入模板和引物，并加入ddH₂O补足体积，使反应体系浓度为1×即可进行 PCR 反应。

该产品具有快速扩增性能，延伸速度 可达10-15s/kb,基因组模板最长可扩增5 kb。具有良好的模板兼容性，对浓度较低的模板有良好的扩增性能，含有PCR抑制剂或AT含量较高的模板也可有效扩增。

质量控制 Quality control

核酸内切酶残留检测

将本产品与超螺旋质粒DNA在37℃温育4 h，通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒无变化。

核酸外切酶残留检测

将本产品与双链DNA底物在37℃温育16 h，通过琼脂糖凝胶电泳检测双链DNA底物无变化。

运输与保存方法 Transportation and preservation methods

冰袋运输；-20℃保存，有效期2年；建议 次使用时分装冻存，避免反复冻融。

使用方法 Usage method

1.常规 PCR 反应体系

a.引物推荐浓度为0.2-0.4 μM，效果不佳时可以在0.1-1 μM浓度范围内进行调整。

b.不同模板 发应浓度有所不同，以50 μl体系为例：模板为基因组DNA时，一般推荐使用量为10-400 ng；当模版为质粒或者病毒DNA时，一般推荐的使用量为10pg-20ng。

2.常规 PCR 反应程序

a.菌落的PCR扩增，预变性时间可延长至10 min，以提高预变性效果。

b.关于延伸速率，当目的片段长度不超过2 kb时，推荐使用15~30 sec/kb；当目的片段长度大于2 kb时，推荐使用30~60 sec/kb。延伸速率与模板复杂程度有关，如遇产率较低可适当提高延伸时间。

注意事项 Matters need attention

1.本产品在短期-20°C储存时不会凝固，可以随取随用，如遇储存温度波动，体系结冰为正常现象不影响使用；

2.建议将所有的反应组分在冰上配制， 加入2×Almighty PCR Mix；

3.使用基因组模板进行较长片段扩增需要使用高质量纯化的DNA模板，可以提高PCR成功率；

4.本产品扩增产物可用于T/A克隆。